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专利号: 2007101445356
申请人: 东北林业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 有机化学〔2〕
更新日期:2024-02-23
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种从木豆枝叶中提取纯化牡荆苷和异牡荆苷的方法,其主要特征在于:木豆新鲜或干燥枝叶经70~80%乙醇匀浆萃取、超声波辅助提取3次,提取液浓缩后加入50~60℃温水,超声波振荡絮凝、静止,所得到上清液经乙酸乙酯负压空化混悬液液萃取法、大孔吸附树脂富集法和一次ODS-C18反相中压硅胶柱层析后得到牡荆苷和异牡荆苷产品,经过低温析晶和重结晶得到纯度大于90%的纯品。

2.按照权利要求1所述的从木豆枝叶中提取纯化牡荆苷和异牡荆苷的方法,其特征在于:木豆枝叶为来源于各品种木豆植株的新鲜或者干燥枝叶。

3.按照权利要求1所述的从木豆枝叶中提取纯化牡荆苷和异牡荆苷的方法,其特征在于:匀浆萃取所用的溶剂为70~80%乙醇,体积为固体质量的4~8倍,连续萃取3次,每次0.5~1.5min,采用70~80%乙醇匀浆时,打破细胞壁的屏障作用,加快了胞内物质向溶剂中的释放。

4.按照权利要求1所述的从木豆枝叶中提取纯化牡荆苷和异牡荆苷的方法,其特征在于:超声波辅助提取所用提取温度为35~50℃,所用的溶剂体积为固体质量的8~10倍,提取时间为30~45min。

5.按照权利要求1所述的从木豆枝叶中提取纯化牡荆苷和异牡荆苷的方法,其特征在于:超声振荡絮凝技术是在提取物浓缩物中加入50~60℃温水的体积为浓缩物的4~6倍,超声波振荡时间为15~25min,频率为50~60KHz,静止时间为10~15min。

6.按照权利要求1所述的从木豆枝叶中提取纯化牡荆苷和异牡荆苷的方法,其特征在于:负压空化混悬液液萃取法所用溶剂为乙酸乙酯,萃取所用的溶剂量为体系的1/2,萃取次数为3~5次,所用压力为0.04~0.06MPa,回收有机溶剂后所得固形物为目标物。

7.按照权利要求1所述的从木豆枝叶中提取纯化牡荆苷和异牡荆苷的方法,其特征在于:大孔吸附树脂富集法所用树脂为D101、AB-8、AL-9或NKA系列大孔吸附树脂中的一种,该方法中大孔树脂吸附步骤采用湿法装柱,保留液面,将负压空化混悬液液萃取所得到的固形物用水配制成料液浓度为10~25mg/mL混悬药液,上样量1~2.5BV,以流速为每小时6~8mL/g树脂、pH=7条件下过吸附柱,吸附后用水2BV洗杂质,然后用60~70%乙醇6~9BV解吸,收集解吸液,浓缩得浸膏,将每毫克浸膏中加入1mL由等体积的甲醇和乙酸乙酯组成的混合液,50℃加热溶解,待冷却至室温得到黄色析出物,干燥后即得目标化合物粗品。

8.按照权利要求1所述的从木豆枝叶中提取纯化牡荆苷和异牡荆苷的方法,其特征在于:ODS-C18反相中压硅胶柱层析技术所用样品为树脂富集后得到的目标化合物粗品,将该粗品用2~8%甲醇溶解,配制成料液浓度为5~10mg/mL的样品液,上样量2~5BV,

0.45μm过滤后注入床体积为50~150mL的ODS-C18反相中压硅胶柱,用水-甲醇、水-乙醇、水-丙酮或水-乙腈系统梯度洗脱,每个梯度2~6BV,收集洗脱液,每份1/4~1/2床体积,用聚酰胺薄膜层析检测洗脱液成分,合并相同部分,展开剂为三氯甲烷∶甲醇=

15∶1~1∶1,显色剂为2%AlCl3乙醇溶液,紫外波长为254nm和360nm。

9.按照权利要求1所述的从木豆枝叶中提取纯化牡荆苷和异牡荆苷的方法,其特征在于:重结晶所用的溶剂为三氯甲烷、二氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇、丙酮、乙腈和乙醇,所用溶剂比例为(三氯甲烷、二氯甲烷或乙酸乙酯)∶(甲醇、丙酮、乙腈或乙醇)=15∶1~

1∶1,低温析晶温度为-10℃~20℃。