1.一种从木豆枝叶提取物中分离纯化木豆素和球松素的方法,其主要特征在于: 木豆枝叶的乙醇提取物加入60℃温水超声波振荡絮凝,静止,所得到絮凝物 经乙酸乙酯负压空化混悬液固萃取、大孔吸附树脂法富集和一次正相硅胶中 压柱层析后分别得到木豆素和球松素的制品,经过低温析晶和重结晶得到纯 度大于95%的纯品。
2.按照权利要求1所述的木豆枝叶乙醇提取物,其特征在于:木豆枝叶主要来 源于各品种木豆植株的新鲜或干燥枝叶,提取方法包括超声波辅助提取、热 回流提取、超临界CO2提取、微波辅助提取等,所用溶剂为70-95%乙醇。
3.按照权利要求1所述的超声波振荡絮凝技术,其特征在于:木豆枝叶乙醇提 取物中加入50~60℃温水的体积为提取物质量的3~5倍,超声波振荡絮凝 时间为15~25min,频率为30~60KHz,静止时间为10~15min。超声波的 震荡作用使得粘稠絮凝物中包含的极性较大的杂质逐渐溶出。
4.按照权利要求1所述的负压空化混悬液固萃取技术,其特征在于:对粘稠絮 凝物进行负压空化混悬液固萃取,所用溶剂除乙酸乙酯外还包括三氯甲烷、 二氯甲烷,萃取所用的溶剂体积为提取物质量的0.5~2%(L∶g),萃取次数 为3~5次,所用压力为0.04~0.06MPa。有机相回收溶剂后所得固形物为目 标物。该方法是以负压为动力,利用气泡产生的空化效应、湍流效应的一种 强化液固萃取工艺。
5.按照权利要求1所述的大孔树脂富集技术,其特征在于:所用树脂包括D101、 NKA-9、NKA-2、H103等广谱性大孔吸附树脂,该方法中大孔树脂吸附步骤 采用湿法装柱,保留液面,将负压空化混悬液固萃取所得到的固形物部分用 20~40%乙醇溶液配制成料液浓度为2~4mg/mL混悬药液,同时将大孔吸附 树脂采用湿法装柱,保留液面,将混悬的药液通过吸附柱,上样量为0.5~1 BV,以流速为每小时6~8mL/g树脂、PH=4条件下过吸附柱。吸附后用30~ 40%乙醇2 BV洗杂质,然后用75~85%乙醇6~8 BV解吸。收集解吸液,浓 缩至干,所得固形物为目标物。
6.按照权利要求1所述的正相硅胶中压柱层析技术,其特征在于:所用样品为 树脂富集后所得固形物,所用硅胶为300~800目。预先称取质量为样品量的 2.5~3倍的硅胶,采用湿法装柱,所用溶剂除石油醚外,还包括乙醚、止己 烷。将样品用少量有机溶剂溶解,加入与浸膏等质量的层析硅胶拌匀、减压 旋干,装入预先装好的硅胶柱中,先后以10~20BV石油醚(60-90℃)、右油 醚∶三氯甲烷(10∶1)、二氯甲烷连续中压洗脱,收集洗脱液,每份1/40~ 1/20BV。用硅胶薄层层析检测洗脱液成分,合并相同部分,展开剂为石油醚∶ 三氯甲烷=0∶1~5∶1,紫外波长为254nm和360nm。中压硅胶柱流动相包 括(石油醚、乙醚、正己烷)-(二氯甲烷、三氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮、甲 醇)的不同比例梯度。
7.按照权利要求1所述所述的低温析晶和重结晶技术,其特征在于:重结晶所 用的溶剂为石油醚、乙醚、正己烷、二氯甲烷、三氯甲烷、丙酮、乙腈和甲 醇,重结晶所用溶剂比例为石油醚(或乙醚、正己烷)∶三氯甲烷(或二氯甲 烷、丙酮、乙腈、甲醇)50∶1-1∶1,低温析晶温度为-10℃~25℃。