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专利号: 2008100259063
申请人: 华南农业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 测量;测试
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1、一种检测莱克多巴胺残留的酶联免疫试剂盒,其特征在于包含下列成分: (1)包被了莱克多巴胺抗原的酶标板; (2)酶标记莱克多巴胺抗体工作液; (3)莱克多巴胺标准溶液; (4)底物液; (5)底物缓冲液; (6)反应终止液; (7)浓缩洗涤液; (8)样品稀释浓缩液。

2、 根据权利要求1所述的酶联免疫试剂盒,其特征在于所述酶标板采用96或40孔酶标板,包被有能与抗莱克多巴胺抗体特异结合 的莱克多巴胺抗原,并封闭微孔表面未吸附莱克多巴胺抗原的位点。

3、 根据权利要求1所述的酶联免疫试剂盒,其特征在于所述莱 克多巴胺抗原是使用碳二亚胺法、活泼酯法或混合酸酐法将莱克多巴 胺半抗原与载体蛋白进行偶联得到。

4、 根据权利要求1所述酶联免疫分析试剂盒,其特征在于所述 酶标记莱克多巴胺抗体工作液是采用戊二醛法或过碘酸钠法将标记 酶与莱克多巴胺抗体进行偶联得到,所述标记酶为辣根过氧化物酶或 细菌提取的碱性磷酸酯酶;所述莱克多巴胺抗体为鼠单克隆抗体、兔 多克隆抗体或基因工程抗体的任意一种。

5、 根据权利要求1所述的酶联免疫试剂盒,其特征在于当标记 酶为辣根过氧化物酶时,所述底物液为含有3, 3, 5, 5 —四甲基联苯胺 或邻苯二胺的pH5. 0磷酸-柠檬酸缓冲溶液,所述底物缓冲液为含有 过氧化氢或过氧化脲的PH5. 0磷酸-柠檬酸缓冲溶液,所述终止液为 1〜2mol/L硫酸溶液或2mol/L的氢氧化钠溶液;当标记酶为细菌提取的碱性磷酸酯酶时,所述底物液为对硝基磷 酸盐缓冲液,所述底物缓冲液为含有过氧化氢或过氧化脲的PH5. 0磷 酸-柠檬酸缓冲溶液,所述终止液为1〜2mol/L硫酸溶液或2mol/L的 氢氧化钠溶液。

6、 根据权利要求1所述的酶联免疫试剂盒,其特征在于所述浓 縮洗涤液为含0.5〜1.5%吐温20的磷酸盐缓冲液,磷酸盐缓冲液 pH7. 4,浓度为0. lmol/L。

7、 根据权利要求1所述的酶联免疫试剂盒,其特征在于所述样 品稀释浓縮液为pH7. 4〜8. 0、 0. 1〜0. 25mol/L、含有50%甲醇的磷 酸盐缓冲液。

8、 根据权利要求1所述的酶联免疫试剂盒,其特征在于所述莱 克多巴胺标准溶液的浓度分别为:8. 1 u g/L、 2. 7 ii g/L、 0. 9 n g/L、 0.3ug/L、 0. lug/L和0ug/L。

9、 一种权利要求1所述酶联免疫试剂盒的使用方法,其特征在 于包括以下步骤:(1) 样品前处理;(2) 使用试剂盒进行检测;(3)结果处理与分析。

10、根据权利要求9所述方法,其特征在于步骤(2)包括以下 步骤:(1) 将试剂盒从冷藏环境中取出,置于室温平衡;(2) 将标准品或待测样品加入已经包被有莱克多巴胺抗原的酶 标板孔内,然后每孔加入酶标记物,轻拍混匀,孵育;(3) 洗涤;(4) 每孔加入等量的底物缓冲液与底物液,轻拍混匀,避光孵育.(5) 每孔加入反应终止液,混合均匀,在波长450nm或492nm 下,以空气为空白,酶标仪测定各孔吸光值。