1、一种3，5-二硝基水杨酸肼酶联免疫检测试剂盒，包括盒体、 特异性抗体溶液、3，5-二硝基水杨酸肼标准溶液、酶标板、样品稀释 液、洗涤液、二抗溶液、显色液A液、显色液B液和终止液，其特征 在于所述特异性抗体为兔抗3，5-二硝基水杨酸肼抗体，所述酶标板 为孔内包被有半抗原与卵清蛋白偶联物的ELISA板条，所述二抗溶液 为辣根过氧化物酶标记的羊抗兔抗体稀释液。

2、根据权利要求1所述3，5-二硝基水杨酸肼酶联免疫检测试剂 盒，其特征在于所述的半抗原为3，5-二硝基水杨酸肼和对羧基苯甲 醛反应，通过氨醛缩合所得化合物，具有式(I)所示的结构：

3、根据权利要求1所述3，5-二硝基水杨酸肼酶联免疫检测试剂 盒，其特征在于所述的特异性抗体溶液是由化合物(I)偶连牛血清 蛋白得到的偶联物，经透析纯化，免疫实验用兔，纯化兔血清，调配 浓度得到的抗体溶液；所述偶联物具有式(II)所示结构：

4、根据权利要求1所述3，5-二硝基水杨酸肼酶联免疫检测试剂 盒，其特征在于所述的半抗原与卵清蛋白偶联物是由化合物(I)与 卵清蛋白通过活泼酯法交联后，透析纯化的产物，具有式(III)所示 结构：

5、一种权利要求1所述3，5-二硝基水杨酸肼酶联免疫检测试剂 盒的使用方法，其特征在于包括以下步骤：(1)样品衍生化前处理；

(2)在试剂盒的酶标板孔中加入50μL溶解有样品的抗体稀释 液和50μL特异性抗体溶液，室温反应30min，洗涤液洗涤，拍干；

(3)在(2)所述酶标板孔中加入二抗稀释液100μL，室温反 应20min，洗涤液洗涤，拍干；

(4)在(3)所述酶标板孔中加入现配的显色液100μL，室温 蔽光显色10min；

(5)在(4)所述酶标板孔中加入终止液体50μL，测定OD450 值。

6、根据权利要求5所述3，5-二硝基水杨酸肼酶联免疫检测试剂 盒的使用方法，其特征在于步骤(1)所述样品衍生化前处理包括盐 酸水解、邻硝基苯甲醛衍生、乙酸乙酯提取、样品稀释液复溶和正己 烷脱脂步骤。

7、根据权利要求6所述3，5-二硝基水杨酸肼酶联免疫检测试剂 盒的使用方法，其特征在于步骤(4)所述现配的显色液是由显色A 液体：显色B液按照1∶1的体积比配制。