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专利号: 2009101008758
申请人: 浙江工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-12-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.微生物催化亚氨基二乙腈制备亚氨基二乙酸的方法,其特征在于所述的方法是利用产腈水解酶的菌株经产酶培养得到腈水解酶催化亚氨基二乙腈制备得到亚氨基二乙酸,所述产腈水解酶的菌株为敏捷食酸菌(Acidovorax facilis)ZJB09122,保藏于中国典型培养物保藏中心,地址:中国,武汉,武汉大学,430072,保藏编号CCTCC No:M 209044,保藏日期

2009年3月18日。

2.如权利要求1所述的方法,其特征在于所述方法为:(A)将所述产腈水解酶的菌株接种至产酶培养基,加入诱导剂a于100~200r/min、20~35℃条件下进行发酵培养2~

5d;所述诱导剂a为正丁腈、异丁腈或己内酰胺;所述产酶培养基终浓度组成为:甘油8g/L,酵母膏6g/L,NaCl 1g/L,K2HPO4 5g/L,MgSO4 0.2g/L,溶剂为水,pH值7.0;所述诱导剂a的终浓度为5g/L,(B)取亚氨基二乙腈配制成质量浓度0.5%~6%的水溶液,调初始pH为7.0~7.5,作为酶催化反应底物溶液;以步骤(A)发酵获得的湿菌体、细胞破碎获得的粗酶液或经固定化得到的固定化细胞作为酶源,酶源加入量以湿菌体计为0.1~10g湿菌体/10mL底物溶液;控制反应温度为30℃、反应pH为6.0~9.0,进行转化反应8~16h,反应结束后,反应液经分离纯化得到亚氨基二乙酸。

3.如权利要求2所述的方法,其特征在于所述的步骤(B)取亚氨基二乙腈配制成质量浓度0.5%~6%的水溶液,以氨水、NaOH或HCl水溶液调pH为7.0~7.5。

4.如权利要求2所述的方法,其特征在于所述的步骤(A)所述的发酵培养在30℃条件下进行发酵培养3d。

5.如权利要求2所述的方法,其特征在于所述的步骤(B)所述的控制反应温度为

30℃,进行转化反应10h。

6.敏捷食酸菌(Acidovorax facilis)ZJB09122,保藏于中国典型培养物保藏中心,地址:中国.武汉.武汉大学,430072,保藏编号CCTCC No:M209044,保藏日期2009年3月18日;