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专利号: 2009101548915
申请人: 浙江工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-12-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种生物催化2-氯-3-氰基吡啶生产2-氯烟酸的方法,所述方法是在以

2-氯-3-氰基吡啶为底物、以红平红球菌(Rhodococcus erythropolis)CCTCC NO:M

209194经发酵培养获得的腈转化酶为催化剂、以水或磷酸盐缓冲液为溶剂的反应体系中,于pH7.0、35℃下进行催化水解反应,制得所述2-氯烟酸;所述方法如下:(1)红平红球菌CCTCC NO:M 209194接种至种子培养基,25~30℃培养16~20h,得到种子液;所述种子培养基终浓度组成如下:葡萄糖10.0~20.0 g/l,蛋白胨5.0~10.0 g/l,己内酰胺4.0~8.0 g/l,MgSO4·7H2O 0.2~0.5 g/l,K2HPO4·3H2O 0.2~0.5 g/l,KH2PO4 0.2~0.5 g/l,FeSO4·7H2O 0.01~0.02 g/l,溶剂为水,pH值6.5~7.0;

(2)步骤(1)种子液以3~10%体积比接种至发酵培养基,在25~30℃、初始pH6.5~7.0条件下震荡培养48~72h,离心分离,得到菌体含酶细胞;所述发酵培养基终浓度组成如下:麦芽糖5.0~15.0 g/l,酵母粉7.0~18.0 g/l,己内酰胺4.0~8.0 g/l,MgSO4·7H2O 0.1~0.5 g/l,K2HPO4·3H2O 0.1~0.5 g/l,KH2PO4 0.1~0.5 g/l,FeSO4·7H2O 0.01~0.02 g/l,溶剂为水,pH值 6.5~7.0;

(3)将步骤(2)菌体含酶细胞添加至含有2-氯-3-氰基吡啶的反应体系中,所述反应体系中菌体含酶细胞以含酶细胞湿重计浓度为10~20g/l,2-氯-3-氰基吡啶初始浓度为

1.0~5.0g/l,于pH7.0、35℃,150r/min下进行催化水解反应12h,制得所述2-氯烟酸。

2.红平红球菌(Rhodococcus erythropolis)ZJB-09149,保藏于中国典型培养物保藏中心,地址:中国 武汉 武汉大学,430072,保藏日期:2009年9月4日,保藏编号CCTCC NO:M 209194。