1.耐酪氨酸冢村氏菌(Tsukamurella tyrosinosolvens)E105,保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC),地址:中国武汉武汉大学,430072,保藏日期:2009年12月16日,保藏编号:CCTCC NO:M 209306。
2.如权利要求1所述的耐酪氨酸冢村氏菌E105,其特征在于所述耐酪氨酸冢村氏菌E105的16S rDNA基因序列如下:ACGCTGGCGGCGTGCTTAACACATGCAAGTCGAACGGTAAGGCCCTTCGGGGTACACGAGTGGCGAACGGGTGAGTAACACGTGGGTGACCTGCCCTGTACTTCGGGATAAGCCTGGGAAACTGGGTCTAATACCGGATATGACCTTCCTCTGCATGGGGGTTGGTGGAAAGCTTTTGCGGTACAGGATGGGCCCGCGGCCTATCAGCTTGTTGGTGGGGTAATGGCCTACCAAGGCGACGACGGGTAGCCGGCCTGAGAGGGCGACCGGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATATTGCACAATGGGCGCAAGCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGGGATGACGGCCTTCGGGTTGTAAACCTCTTTCAGCTACGACGAAGCGCAAGTGACGGTAGTAGCAGAAGAAGCACCGGCCAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGGTGCGAGCGTTGTCCGGATTTACTGGGCGTAAAGAGCTCGTAGGCGGTTTGTCACGTCGTCTGTGAAAACCCGAGGCTTAACCTCGGGCCTGCAGGCGATACGGGCAGACTTGAGTACTGTAGGGGAGACTGGAATTCCTGGTGTAGCGGTGGAATGCGCAGATATCAGGAGGAACACCGGTGGCGAAGGCGGGTCTCTGGGCAGTAACTGACGCTGAGGAGCGAAAGCGTGGGTAGCGAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGGTGGGTACTAGGTGTGGGTTTCCTTCCACGGGATCCGTGCCGTAGCTAACGCATTAAGTACCCCGCCTGGGGAGTACGGCCGCAAGGCTAAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGCGGAGCATGTGGATTAATTCGATGCAACGCGAAGAACCTTACCTGGGTTTGACATATAGAGGATCGCCGGAGAGATTCGGTTTGCCTTGTGCCTTCTATACAGGTGGTGCATGGCTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTTGTCTCATGTTGCCAGCACGTTATGGTGGGGACTCGTGAGAGACTGCCGGGGTCAACTCGGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAAGTCATCATGCCCCTTATGTCCAGGGCTTCACACATGCTACAATGGCGCGTACAGAGGGCTGCGATACCGTGAGGTGGAGCGAATCCCTTAAAGCGCGTCTCAGTTCGGATTGGGGTCTGCAACTCGACCCCATGAAGTCGGAGTCGCTAGTAATCGCAGATCAGCAACGCTGCGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACGTCATGAAAGTCGGTAACACCCGAAGCCGGTGGCCTAACCCCTTGTGGGAGGGAGCTGTCGAAGG。
3.如权利要求1所述的耐酪氨酸冢村氏菌E105在手性生物催化制备(S)-α-乙基-2-氧-1-吡咯烷乙酸中的应用。
4.如权利要求3所述的应用,其特征在于所述的应用为:以外消旋体α-乙基-2-氧-1-吡咯烷乙酯为底物,加入耐酪氨酸冢村氏菌(Tsukamurellatyrosinosolvens)E105湿菌体细胞,25℃~35℃下,于pH为6.0~8.0的缓冲液中进行转化反应12~60小时,反应结束后反应液经分离纯化得到(S)-α-乙基-2-氧-1-吡咯烷乙酸。
5.如权利要求4所述的应用,其特征在于所述缓冲液中底物外消旋体α-乙基-2-氧-1-吡咯烷乙酯初始浓度为5.2~31.2g/L,耐酪氨酸冢村氏菌E105湿菌体细胞的初始浓度以干重为10~35g/L。
6.如权利要求4所述的应用,其特征在于所述转化反应在pH为7.0的磷酸盐缓冲液中进行。
7.如权利要求4所述的应用,其特征在于:所述耐酪氨酸冢村氏菌E105湿菌体细胞由如下方法制备得到:将耐酪氨酸冢村氏菌E105菌种接种至发酵培养基,30℃、200rpm振荡培养36小时,发酵液离心、洗涤沉淀,收集得到湿菌体细胞;所述发酵培养基终浓度组成如下:葡萄糖10~35g/L,酵母粉5~30g/L,NH4Cl1.9~11.4g/L,K2HPO40.7~3.3g/L,KH2PO40.3~1.7g/L,MgSO4·7H2O 0.2~1.0g/L,NaCl 0.2~1g/L,pH 6.3~7.5。
8.如权利要求4所述的应用,其特征在于所述应用如下:
(1)将耐酪氨酸冢村氏菌E105菌种接种至发酵培养基,30℃、200rpm振荡培养36小时,发酵液离心、洗涤沉淀,收集得到湿菌体细胞;所述发酵培养基终浓度组成如下:葡萄糖15g/L,酵母粉12.1g/L,NH4Cl 9.5g/L,KH2PO41lgL,K2HPO42g/L,MgSO40.6g/L,NaCl 0.6g/L,pH 7.0;
(2)取100mM pH为7.0的磷酸盐缓冲液,加入步骤(1)所得湿菌体细胞,所述湿菌体细胞浓度以干重计为30g/L,并加入底物外消旋体α-乙基-2-氧-1-吡咯烷乙酯至底物浓度为15.2g/L,30℃摇床振荡反应36小时,反应结束后将反应液离心,取上清液,加入等体积的乙酸乙酯萃取两次,得到(S)-α-乙基-2-氧-1-吡咯烷乙酸。