1、一种测定磷酸化多糖中磷含量的方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)绘制标准曲线并建立回归方程：取一定质量的NaH2PO4定容于容量 瓶中制备磷酸根浓度为10ug/ml的母液，再依次稀释制备0.2、0.5、1、2、3、 4、5、7、9、10ug/ml的磷酸根梯度标准溶液，分别取上述梯度标准溶液3～ 5ml，加入1.8～3ml pH值为7.0的Tris缓冲液，摇匀后加入1.2～2ml浓度 为125mg/ml的抗坏血酸水溶液，静置1～2min之后依次加入1.8～3ml浓度 为1mol/L的H2SO4和0.6～1ml浓度为30mg/ml的钼酸铵溶液，混合均匀后 在30～45℃的恒温水浴锅中保温20～30min，以蒸馏水代替所述标准溶液作 为空白对照按同样条件处理，然后在824nm处测定光吸收值，以磷酸根浓度 为横坐标，光吸收值为纵坐标，绘制标准曲线并建立回归方程；

(2)样品的处理：在恒温箱中将磷酸化多糖待测样品在50～60℃下处理 30～45min除去残余水分，称取一定质量上述干物质样品，加入混酸，其中样 品与混酸的比例为，重量∶体积＝1～2.5mg∶1ml，所述混酸中各成分的体积 份数比为HNO3∶HClO4＝4∶1，静止过夜后在120℃中消解1～2小时至溶液澄清， 得消解液A；

(3)磷含量的测定：将消解液A在40～60℃、0.06～0.08MPa下减压浓 缩蒸干得到干物质B，将干物质B定容在容量瓶中制备成B溶液，使其磷酸 根浓度在0.2～10ug/ml范围内，取与步骤(1)中梯度标准溶液相同体积的所 述B溶液并按照与与步骤(1)中相同的条件处理，即取B溶液3～5ml，加 入到1.8～3ml pH值为7.0的Tris缓冲液中，摇匀后加入1.2～2ml浓度为125 mg/ml的抗坏血酸水溶液，静置1～2min之后依次加入1.8～3ml浓度为1mol/L 的H2SO4和0.6～1ml浓度为30mg/ml的钼酸铵溶液，混合均匀之后在30～ 45℃的恒温水浴锅中保温20～30min，以蒸馏水代替所述B溶液作为空白对 照按同样条件处理，然后在824nm处测定光吸收值，每个样品测定三次光吸 收值，取其平均值代入步骤(1)中所建立的回归方程，算出定容后样品溶液 的磷酸根浓度；然后，根据所定容的样品溶液的体积算出所定容样品B溶液 中磷酸根含量，再根据所用磷酸化多糖干物质样品的重量算出所测磷酸化多 糖干物质中磷酸根的含量，最后根据磷在磷酸根中的含量算出所测磷酸化多 糖的磷含量。