1.一种食品中鸡蛋过敏原卵清蛋白含量的酶联免疫检测方法，其特征在于(1)抗原的包被

用高纯度卵清蛋白作为包被抗原，以包被缓冲液pH 9.6、0.05M的碳酸钠缓冲液CBS稀释包被抗原，包被抗原浓度为0.125～256μg/mL作为包被液，在酶标板的每孔中加入100μL包被液，4℃孵育过夜，用含0.1％明胶的包被缓冲液作为封闭液封闭；

封闭液为含0.1％明胶的pH 9.6、0.05M的CBS；

(2)竞争反应

将高纯度卵清蛋白免疫制备的卵清蛋白多克隆抗体用抗体稀释液PBST按1∶4000重量比稀释后，加入酶标板中，每孔加50μL，同时分别加入用标准品稀释液稀释的系列浓度0.125μg/mL，0.25μg/mL，0.5μg/mL，1.0μg/mL，2.0μg/mL，4.0μg/mL，8.0μg/mL，16μg/mL，32μg/mL，64μg/mL，128μg/mL，256μg/mL的高纯度卵清蛋白标准品，每孔50μL，37℃孵育1h后以PBST洗涤液洗涤4次；

抗体稀释液PBST为含1％明胶、含0.5％吐温-20、pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液；

PBST洗涤液的配方为1000mL蒸馏水中加入氯化钠8g、磷酸二氢钾0.2g、磷酸氢二钠2.9g、氯化钾0.2g、吐温-200.5mL；

标准品稀释液的配方为在含30％体积甲醇的pH 6.5的PBS中加入质量浓度为5％的氯化钠；

(3)加酶标二抗

辣根过氧化物酶标记的羊抗兔HRP-IgG以抗体稀释液PBST稀释为1∶3000，每孔加100μL，37℃温育1h后以PBST洗涤液洗涤4次；

(4)显色

每孔加入100μL显色液，暗处37℃反应15min，取出后每孔加入100μL终止液2mol/L的硫酸，用酶标仪测定吸光值OD450；

显色液包括A液和B液，A液配方为每100mL水中加入0.933g柠檬酸，3.68g Na2HPO4·12H2O，18μL30％H2O2；B液配方为60mg四甲基联苯胺溶于100mL乙二醇；使用时按A∶B＝5∶1体积比使用。

2.根据权利要求1所述的酶联免疫检测方法，其特征在于所述的高纯度卵清蛋白为购于SIGMA公司的A7642高纯度卵清蛋白。