一株不对称制备(S)?苯基乙二醇的重组菌，其分类命名为巴斯德毕赤酵母（Pichia?pastoris）SCRⅡG?，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号：CGMCC?No.4198。

2.利用重组菌CGMCC No. 4198不对称转化制备C?)-苯基乙二醇的方法，其特征在于 不对称转化反应条件：在0. 1 mol/L pH 5. 5的醋酸缓冲液中，加质量/体积比5%葡萄糖， 底物2-羟基苯乙酮的浓度为6 mg/mL，重组菌细胞浓度为0. 1 g/mL，不加辅助底物，反应温 度为35°C，反应时间为24 h，转速150 r/min，重组菌菌体重复利用十个批次。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于重组菌的培养BMGY培养基，以质量/体积％计：酵母膏1%，蛋白胨2%，甘油1%，pH 6. 0、100 mmol/L 磷酸缓冲液10%，YNB 1. 34%，生物素4X 10_5 %，用去离子水补足至100% ；BMMY培养基，以质量/体积％计：酵母膏1%，蛋白胨2%，甲醇0. 5%，pH 6. 0、100 mmol/ L磷酸缓冲液10%，YNB 1. 34%，生物素4X 10_5 %，用去离子水补足至100% ；培养条件：将重组菌CGMCC No. 4198按1%的接种量接种于装有25 mL BMGY培养基的 100 mL摇瓶中，在28°C、250 r/min的条件下，培养至菌浓彻_=2_ 6 ；室温3000 g离心5 min，收集菌体，用100 mL BMMY重悬菌体，使为1. 0，置于500 mL的摇瓶中，在28°C、 250 r/min的条件下培养，每12 h，按培养基质量/体积％计添加甲醇0. 5%至培养基中，培 养96h，10，000 rpm离心10 min，沉淀用生理盐水洗涤两次，收集得到重组菌全细胞。

4.权利要求1所述重组菌CGMCC No. 4198的构建方法，其特征在于将scr II基因插入 PPIC3. 5K中构建重组质粒pPIC3. 5K-SCR II，电击转化毕赤氏酵母GS115感受态细胞，获得 重组菌PicAia pastoris/x>?lC?,. 5K-SCR II ；同时将基因ZWFl插入载体pPICZa，获得重组 质粒pPICZ a -ZWFl，用feci对pPICZ a -ZffFl进行单酶切线性化，电转化感受态重组毕赤 酵母/7ZcAia pastor is/ pPIC3. 5K-SCR II 的感受态细胞，涂布含有 100 μ g/mL Zeocin 的 YPD平板，挑取阳性单克隆得到重组菌PicAia pastoris/^CR II G。

5.根据权利要求4所述的构建方法，其特征是重组质粒pPIC3. 5K-SCR II的构建：利用 限制性内切酶I和Afoi I分别对载体PPIC3. 5K和基因片段scr II进行酶切，纯化后 的基因片段与载体通过粘性末端进行连接，获得重组质粒PPIC3. 5K-SCR II。

6.根据权利要求4所述的构建方法，其特征是重组质粒pPICZ a-ZWFl的构建，利用限 制性内切酶feiB I和损ο I分别对载体pPICZ α和基因片段ZWFl进行酶切，纯化后的基因片段与载体通过粘性末端进行连接，获得重组质粒pPICZ a -ZffFl。

7.根据权利要求4所述的构建方法，其特征是基因片段scr II的获取：实验室已知 scr II基因全序列，以近平滑假丝酵母的基因组为模板，设计含有BamR I酶切位点的引物SCR II _pPIC3. 5K_F和含有AfoiI酶切位点的引物SCR II _ PPIC3. 5K_R，通过PCR，获得scr II基因全长。

8. SCR II _pPIC3. 5K_F: CGGGATCCACCATGGGCCATCATCATCATCATCATAGC AGTGGCATGGGCGAAATCGAATCSCR II _pPIC3. 5K_R: TTGCGGCCGCCTATGGACAAGTGTAACCACCATCGACPCR 反应体系：10 X Taq buffer 5 μ L,25 mmol/L 的 dNTP 4 μ L,50 pmol/yL 的弓丨物 SCR II _pPIC3. 5K_F 和 SCR II _pPIC3. 5K_R 各 1 μ L，近平滑假丝酵母 DNA`5 μ L，5 U/μ L 的 Taq DNA polymerase 0.5 μ L, ddH20 33.5 μ L，反应总体积 50μ L ;PCR 反应条件：95°C预变性 4 min ;94°C 1 min,58°C 1 min,72°C 1 min，进行 30 个循 环；72°C延伸10 min ；获得scr II基因。

9.根据权利要求4所述的构建方法，其特征是基因片段ZWFl的获取：通过NCBI检索得 到ZWFl基因全长，以酿酒酵母基因组为模板，利用含feiB I酶切位点的引物pPIC_G6PDH_ F和含炀ol酶切位点的引物pPIC_G6PDH_R，通过PCR，获得ZWFl基因的全长为1518 bp; pPIC_G6PDH_F: ACTGTTCGAAACGATGAGTGAAGGCCCCGTCAAATTTG AAAAAAATACCG pPIC_G6PDH_R: CACGCTCGAGCTAATTATCCTTCGTATCTTCTGGCPCR 反应体系：10XTaq buffer 5 μ L,25 mmol/L 的 dNTP 4 μ L,50 pmol/yL 的弓| 物 pPIC_G6PDH_F 和 pPIC_G6PDH_R 各 1 μ L，酿酒酵母基因组 5 μ L,5 U/ μ L 的 Taq DNA polymerase 0. 5 μ L, ddH20 33. 5 μ L,反应总体积 50 μ L ；PCR 反应条件：94°C 预变性 5 min ；94°C 1 min，55°C 1 min，72°C 1 min，进行 30 个循环，72°C 延伸10 min ；获得ZWFl基因。