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专利号: 2011100279637
申请人: 山东理工大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 测量;测试
更新日期:2024-02-23
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种电化学农药残留快速检测仪,包括一农药检测模块、一与所述农药检测模块连接的微型处理器系统,其特征在于,所述农药检测模块包括一乙酰胆碱酯酶生物传感器,所述乙酰胆碱酯酶生物传感器的信号输出端连接所述微型处理器系统的信号输入端,所述微型处理器系统连接一显示器;

乙酰胆碱酯酶生物传感器将放入含有农药的样品液前后的电流信号传送给微型处理器系统,微型处理器系统将所述电流信号进行处理,得到农药浓度,并将所述农药浓度显示在显示器上,共查看。

2.根据权利要求1所述的一种电化学农药残留快速检测仪,其特征在于,所述微型处理器系统包括一单片机,所述单片机的信号输出端连接一D/A转化模块,所述D/A转化模块连接所述乙酰胆碱酯酶生物传感器的信号输入端;

所述乙酰胆碱酯酶生物传感器的信号输出端连接一I/V转换模块,所述I/V转换模块连接一差分放大电路,所述差分放大电路连接一低通滤波电路,所述低通滤波电路连接所述单片机的信号输入端。

3.根据权利要求2所述的一种电化学农药残留快速检测仪,其特征在于,所述单片机连接所述显示器,所述单片机还连接一按键组,通过所述按键组和所述显示器,选择蔬果品种和农药种类。

4.根据权利要求1、2或3所述的一种电化学农药残留快速检测仪,其特征在于,所述乙酰胆碱酯酶生物传感器采用一三电极体系结构的传感器,所述乙酰胆碱酯酶生物传感器包括一玻碳电极、一参比电极、一对电极,所述玻碳电极上固定有壳聚糖膜,所述壳聚糖膜上固定有乙酰胆碱酯酶;

将工作电压施加在所述玻碳电极和所述参比电极之间时,所述玻碳电极和所述对电极之间产生电流信号,所述乙酰胆碱酯酶生物传感器将所述电流信号传送给所述微型处理器系统,所述微型处理器系统将所述电流信号进行处理,得到农药浓度,并将所述农药浓度显示在显示器上,供查看。

5.根据权利要求4所述的一种电化学农药残留快速检测仪,其特征在于,所述壳聚糖膜采用以下方法制得:将醋酸纤维膜置于0.1mol/L、pH8.0的磷酸盐缓冲溶液中,3℃下浸泡48h以上,完成醋酸纤维膜的预处理;取0.1g壳聚糖粉末,加入10ml 1%(m/m)的醋酸水溶液,搅拌10min至形成黄色的溶胶;室温下3000r/min离心5min除去不溶颗粒;将所述醋酸纤维膜置于所述溶胶中浸泡12h,取出晾干后再置于0.1mol/L、pH8.0的PBS浸泡12h,取出晾干,制得所述壳聚糖膜。

6.根据权利要求5所述的一种电化学农药残留快速检测仪,其特征在于,将所述乙酰胆碱酯酶固定在所述壳聚糖膜上的固定方法采用以下方法:依次取200μL的AChE、20μL

5%(体积分数)的戊二醛、60μL1%(质量分数)的牛血清蛋白(BSA)于1mL塑料离心管中,离心管置于冰浴上;添加0.1mol/L、pH8.0的磷酸盐缓冲溶液720μL;将上述物质充分混匀,当液体的上部出现很多泡沫时,表示已经混匀,制得乙酰胆碱酯酶溶液;

取预先处理好的壳聚糖膜一片浸入该酶溶液中,4℃下保持8h;8h后,取出酶片,分别用0.1mol/L、pH8.0的磷酸盐缓冲溶液冲洗至少两次,直到液体中没有任何的泡沫为止;最后将酶片浸泡在0.1mol/L、pH8.0的磷酸盐缓冲溶液中,4℃下保存,制得酶膜,完成固定。

7.根据权利要求6所述的一种电化学农药残留快速检测仪,其特征在于,所述玻碳电极采用功能化多壁碳修饰,所述壳聚糖膜通过O型圈固定在功能化多壁碳修饰过的玻碳电极上;所述功能化多壁碳修饰,采用如下方法:

1)多壁碳纳米管的功能化:称取10mg的多壁碳纳米管(MWNTs),放入100mL的烧杯中,量取40mL浓HNO3和H2SO4混合液(V∶V=1∶3)加入所述烧杯中混合后,超声4h、120℃离心回流3h,水洗至中性,红外炉干燥,室温下保存待用;

2)所述玻碳电极修饰前,用0.3μm、30nm的Al2O3浆抛光至镜面,抛光后用双蒸水洗去表面污物,再移入超声水浴中清洗,每次2~3min,重复三次,最后依次用1∶1乙醇、

1∶1HNO3和去离子水超声清洗,氮气环境下干燥;

3)清洗后,所述玻碳电极要在0.5mol/L的H2SO4溶液中用循环伏安法活化,扫描范围为-0.6~1.0V,扫速0.1V/S,反复扫描直至达到稳定的循环伏安图为止;最后在0.20mol/-3L KNO3中记录1×10 mol/L K3Fe(CN)6溶液的循环伏安曲线,以测试所述玻碳电极的性能,扫描速度50mV/S,扫描范围为-0.1V~0.6;当所述循环伏安曲线中的峰电位差在80mV以下,所述玻碳电极可使用,否则要重新处理所述玻碳电极,直到符合要求;

4)取2μL包含功能化的多壁碳纳米管0.12(w/v)%、壳聚糖0.48(w/v)%、戊二醛

4.7(v/v)%的凝胶状混合物悬滴在清洗干净的所述玻碳电极表面,室温下干燥8h,随后用-1

0.1mol L 磷酸盐缓冲液(pH 8.0)冲洗,4℃保存备用,完成所述玻碳电极的修饰。

8.一种电化学农药残留检测方法,其特征在于,包括以下步骤:

1)根据待测果蔬,选择匹配的蔬果品种和待测农药种类;

2)计算农药活性抑制率:将电化学农药残留快速检测仪的乙酰胆碱酯酶生物传感器放入含有10mL的磷酸盐缓冲液中进行循环伏安检测,得到氧化峰电流值I0;

再将乙酰胆碱酯酶生物传感器放入样品液中孵化10分钟,取出后用磷酸盐缓冲液冲洗干净,再放入含有10mL的磷酸盐缓冲液中进行循环伏安检测,得到氧化峰电流值I1;

计算乙酰胆碱酯酶在接触农药前后的活性抑制率,计算公式如下:

3)获得农药浓度:根据预设的抑制率和农药浓度的关系模型,获得农药的浓度;

4)显示:通过显示器显示农药的浓度。

9.根据权利要求8所述的一种电化学农药残留检测方法,其特征在于,所述乙酰胆碱酯酶生物传感器采用以下方法制作:将乙酰胆碱酯酶固定在壳聚糖膜上;采用功能化多壁碳修饰玻碳电极;将所述壳聚糖膜通过O型圈固定在功能化多壁碳修饰过的玻碳电极上,制得乙酰胆碱酯酶生物传感器。

10.根据权利要求9所述的一种电化学农药残留检测方法,其特征在于,当选择待测农药种类为敌敌畏农药时,预设的敌敌畏农药的抑制率和农药浓度的关系模型如下:当I%-1 -1 -1的浓度范围在25ngL ~50ngL 时,I%=35.929x-35.761;当I%的浓度范围在50ngL ~-1

100μgL 时,I%=18.697x-5.3303;其中I%为活性抑制率,x为农药浓度。