1.一种利用黄芩毛状根转化对苯二酚合成熊果苷的方法,其特征在于包括以下步骤:培养黄芩毛状根,利用培养后的黄芩毛状根转化对苯二酚合成熊果苷。
2.根据权利要求1所述一种利用黄芩毛状根转化对苯二酚合成熊果苷的方法,其特征在于:所述培养黄芩毛状根的培养基为改良MS培养基,该改良MS培养基包含大量元素、微量元素、铁盐和有机成分,pH为5.4~6.0;
所述大量元素包含950mg/L的KNO3、42.5mg/L的KH2PO4、185mg/L的MgSO4·7H2O、220mg/L的CaCl2·2H2O和500mg/L的水解乳蛋白;
所述微量元素包含0.83mg/L的KI、6.2mg/L的H3BO3、22.3mg/L的MnSO4·4H2O、8.6mg/L的ZnSO4·7H2O、0.25mg/L的 Na2MoO4·2H2O、0.025mg/L 的CuSO4·5H2O和0.025mg/L 的CoCl2;
所述铁盐包含18.65mg/L的Na2·EDTA和13.9mg/L的FeSO4·7H2O;
所述有机成分包含100mg/L的肌醇、2mg/L的甘氨酸、0.1mg/L的盐酸硫胺素、0.5mg/L盐酸吡哆醇和0.5mg/L的烟酸。
3.根据权利要求2所述一种利用黄芩毛状根转化对苯二酚合成熊果苷的方法,其特征在于:所述培养黄芩毛状根的方法为:
1)将黄芩毛状根以4-5g/L接种于黄芩毛状根种子培养基中于100~150r/min下避光震荡培养18~20天得黄芩毛状根种子,培养的温度25~28℃,黄芩毛状根种子培养基为添加40-50g/L蔗糖的改良MS培养基;
2)将黄芩毛状根种子以4-5g/L接种于培养基中于100~150r/min下避光震荡培养
20~30天,培养的温度为25~28℃,培养基为添加30-60g/L蔗糖、葡萄糖或其混合物和
0.4mmol/L苯丙氨酸的改良MS培养基。
4.根据权利要求1或3所述一种利用黄芩毛状根转化对苯二酚合成熊果苷的方法,其特征在于:所述转化的时间为30~40h,转化时的温度为20~28℃。
5.根据权利要求1所述一种利用黄芩毛状根转化对苯二酚合成熊果苷的方法,其特征在于:所述对苯二酚在加入前用体积分数70%的乙醇水溶液进行溶解,溶解比例为每
1-5mL乙醇水溶液溶解20mg对苯二酚。
6.根据权利要求1所述一种利用黄芩毛状根转化对苯二酚合成熊果苷的方法,其特征在于:所述对苯二酚的加入量为每100mL黄芩毛状根的培养液中加入15~25mg。