1.一株具有高立体选择性羰基还原酶活性的微生物菌株,其分类命名为克鲁维假丝酵母(Kluyveromyces sp.)JNU-KR1,现保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏号:CCTCC NO:M 2011385。
2.用微生物CCTCC NO:M 2011385不对称氧化还原制备(S)-(4-氯苯基)-(吡啶-2-基)-甲醇的方法,(S)-(4-氯苯基)-(吡啶-2-基)-甲醇简写(S)-CPMA,其特征是以CCTCC NO:M 2011385全细胞为催化剂,在单一水相或双水相反应体系中对潜手性4-氯苯基-(吡啶-2-基)-甲酮CPMK进行不对称还原,制备具有高光学纯度的(S)-(4-氯苯基)-(吡啶-2-基)-甲醇,步骤如下:(1)湿菌体的培养:培养基组成以g/L计为:葡萄糖5-50,酵母膏3-30,磷酸二氢钾 1-10,七水合硫酸镁 0.2-2,pH4-9,发酵培养1-5天,发酵液过滤获得湿菌体;
(2)配置反应体系:以4-氯苯基-(吡啶-2-基)-甲酮为底物,用磷酸盐缓冲液配制成的单一水相反应体系,底物浓度为0.1-10 g/L,葡萄糖浓度10-100 g/L;或用不同分子量的PEG与不同无机盐溶液配制成的各种双水相反应体系,底物浓度为0.5-20 g/L,葡萄糖浓度10-100 g/L;
(3)酶转化反应:在反应体系中加入CCTCC NO:M 2011385湿菌体50-250 g/L,于25-45 ℃进行酶反应,反应时间为3-72 h;
(4)转化液后处理:用乙酸乙酯萃取转化液,将萃取获得的有机相蒸发回收溶剂,采用硅胶柱层析进一步分离纯化,再干燥脱水,蒸发回收溶剂,获得无色油状液体产物(S)-(4-氯苯基)-(吡啶-2-基)-甲醇。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于反应体系为由0.1-0.5 mmol/L、pH6-
8 磷酸盐缓冲液配制的单一水相体系,或由分子量为2000-20000的不同PEG 与KH2PO4、Na2HPO4、(NH4)2SO4 或Na2SO4各种无机盐配制的不同双水相反应体系。
4.根据权利要求2所述的方法,其特征在于酶转化反应条件为:底物浓度为1-10 g/L,湿菌体浓度50-250 g/L,反应温度25-35 ℃,反应时间12-72 h。
5.根据权利要求2所述的方法,其特征在于在质量浓度20% PEG 4000 /质量浓度14% Na2HPO4双水相反应体系中,最终产物e.e. 值达到85%,产率达到92%。