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专利号: 2011104273841
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 测量;测试
更新日期:2023-10-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种快速测定固态发酵物曲、酒醅或发酵醪中氨基甲酸乙酯EC的方法,其特征在于对固态发酵物进行超声萃取,离心取上清液置于顶空瓶中,加入内标溶液氨基甲酸丙酯PC,再加入氯化钠饱和,旋紧瓶盖,插入萃取头搅拌吸附,萃取富集EC,再用气相色谱-质谱联用技术进行定量分析;步骤为:(1)超声萃取:取10 g固态发酵物,加入20 mL实验专用水,浸泡30 min,超声萃取30 min,离心取上清;所述实验专用水为超纯水煮沸5-10min冷却;

(2)顶空固相微萃取:吸取上述超声萃取后上清液8 mL置于20 mL的顶空瓶中,加入

5 μL乙醇配制的内标溶液PC,加入3 g氯化钠,旋紧瓶盖,插入萃取头,在50-70℃下250 rpm恒温搅拌萃取30-60 min;

(3)气相色谱-质谱联用检测:萃取完毕后将萃取头取出,插入气相色谱进样口250℃热解吸5 min,毛细管柱为DB-WAX或HP-5,载气为He,流速2 mL/min;不分流进样;程序升温:50℃恒温2 min,以5℃/min的速度升温至170℃,再以10℃/min的速度升温至

230℃,保持5 min;MS条件为EI电离源,电子能量70 eV,离子源温度230 °C,扫描范围

35.00~350.00 amu,SIM模式特征离子62;通过将样品和标准品的保留时间对比来确认目标物EC以及内标物PC峰;

DB-WAX毛细管柱为:60或30 m×0.25 mm i.d.×0.25 μm;

HP-5毛细管柱为:60或30m×0.25 mm i.d.×0.25 μm;

(4)标准曲线的建立:制作标准曲线所用的一系列EC浓度的溶液,先用EC标准品和色谱纯无水乙醇配制而成的高浓度EC溶液作为储藏液,其他浓度梯度EC溶液均用储藏液逐步稀释所得;将上述稀释后的EC溶液加入到实验专用水中,加入内标溶液PC,顶空固相微萃取富集,最后进行GC-MS定量检测,以EC与PC峰面积之比为横坐标,EC与PC的浓度比为纵坐标,绘制标准曲线;

(5)酒曲、酒醅或发酵醪样品测定:对样品采用浸泡、超声萃取预处理,离心后取上清液,然后用顶空固相微萃取技术富集上清液中的EC,再用气相色谱-质谱联用进行定性定量分析,根据样品中EC/PC的面积比,对照标准曲线计算样品中EC的含量。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于所述萃取头为PDMS、PA、PDMS/DVB、或DVB/CAR/PDMS。