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专利号: 2012102134196
申请人: 浙江工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-08-24
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种式(Ⅱ)所示的R-2-(4-羟基苯氧基)丙酸酯的制备方法,所述方法包括:以式(Ⅰ)所示的外消旋2-(4-羟基苯氧基)丙酸酯为反应底物,在微生物酯水解酶作用下,进行选择性水解反应制得所述的R-2-(4-羟基苯氧基)丙酸酯;所述微生物酯水解酶来自米曲霉(Aspergillus oryzae)CCTCC No:M 206105;

式(Ⅰ)、(Ⅱ)中,R为C1~C4的烷基。

2.如权利要求1所述的方法,其特征在于所述选择性水解反应在pH6.0~8.0的缓冲液中进行。

3.如权利要求2所述的方法,其特征在于所述选择性水解反应在pH7.0的磷酸盐缓冲液中进行。

4.如权利要求2或3所述的方法,其特征在于缓冲液中底物外消旋2-(4-羟基苯氧基)丙酸酯的初始浓度为5~100g/L,微生物酯水解酶的初始浓度为1~20g/L。

5.如权利要求2或3所述的方法,其特征在于所述微生物酯水解酶按如下方法制备:

将米曲霉CCTCC No:M 206105接种至产酶培养基,30~37℃、转速150~200r/min条件下培养2~3天,过滤得到菌丝体,离心取沉淀干燥,即得含有所述微生物酯水解酶的酶粉;所述产酶培养基终浓度组成为:葡萄糖20~60g/L,蛋白胨20~50g/L,蔗糖10~60g/L,尿素3~9g/L,NaCl 4~8g/L,k2HPO4 2~5g/L,MgSO4 1~3g/L,(NH4)2SO44~8g/L,溶剂为水,pH自然。

6.如权利要求2或3所述的方法,其特征在于所述缓冲液中还添加有体积为缓冲液体积10~20%的助溶剂,所述助溶剂为下列之一:丙酮、乙腈或二甲基亚砜。

7.如权利要求2或3所述的方法,其特征在于选择性水解反应在10~50℃下进行,反应时间1~20小时。