1.一种微生物转化苯甲酰甲酸甲酯制备(S)-(+)-扁桃酸甲酯的方法,所述方法包括:
以苯甲酰甲酸甲酯为底物,以酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)CGMCC No.2230在发酵获得的含酶菌体细胞为生物催化剂,在邻苯二甲酸二丁酯中,于20~35℃下进行转化反应
8~96小时,转化液经分离纯化得到所述(S)-(+)-扁桃酸甲酯;在邻苯二甲酸二丁酯中底物苯甲酰甲酸甲酯的初始浓度为1~300mmol/L。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于所述含酶菌体细胞经固定化之后作为生物催化剂,其用量为:每L邻苯二甲酸二丁酯中含有的生物催化剂相当于以包埋法将1.0~4.0g的含酶菌体细胞固定化后再经增殖培养16~72小时获得的固定化细胞颗粒。
3.如权利要求2所述的方法,其特征在于所述生物催化剂制备方法如下:将酿酒酵母菌株CGMCC No.2230发酵培养获得的菌体浓度为3.0~10.0g/L的发酵液与等体积质量浓度
1~5%的海藻酸钠溶液混合,搅拌均匀得到混合液,将混合液逐滴滴入质量浓度为2.5~4.0%的氯化钙溶液中,连续搅拌得到固定化悬浮液,放置于35~38℃条件下固化,得到的固定化颗粒用无菌生理盐水洗涤后,分散于发酵培养基中进行增殖培养16~72h获得增殖培养后的固定化细胞颗粒,即为生物催化剂。
4.如权利要求3所述的方法,其特征在于所述发酵培养基组成如下:葡萄糖26~32g/L,酵母 粉2~4g/L,硫酸铵3~6g/L,无水MgSO40.2~0.4g/L,K2HPO4·3H200.5~1.5g/L,KH2PO40.6~1.5g/L,pH自然,溶剂为水。
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于所述分离纯化方法如下:反应结束后,将转化液过滤除去生物催化剂,将转化液减压蒸馏,收集馏分经过硅胶柱层析分离,获得产物(S)-(+)-扁桃酸甲酯。