1.一种桑黄活性多糖的制备方法,其特征在于:所述方法包含有以下的步骤:
1)菌种活化
在改良PDA培养基中接种桑黄菌丝体,25~30℃,有氧避光培养至桑黄菌丝体长满斜面;
上述的改良PDA培养基中,以1L计算:马铃薯190g、葡萄糖15g、琼脂20g、抗氧化剂
1.5g,余量为水,改良PDA培养基的pH为6.5;
上述桑黄菌丝体的名称为Phellinus sp.P0988,保藏单位为中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M 2012080,保藏日期是2012年3月14日;
2)一级种子液培养
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按照每50ml的种子液培养基中接入3块1cm 的斜面菌种的量,将活化后的斜面菌种接入装有种子液培养基的三角瓶中,25~30℃,摇床培养120~240小时,摇床转速150~
180r/min;
上述的种子液培养基中,以1L计算:马铃薯230g、葡萄糖15g、KH2PO41g、MgSO40.5g、抗氧化剂3g、CaCl20.5g、FeSO40.25g,余量为水,种子液培养基的pH为6.5;
3)二级种子液培养
将步骤2)所得的菌种按照菌种与种子液培养基的体积比为1:10~15的量接入装有种子液培养基的三角瓶中,25~30℃摇床培养120小时,摇床转速180r/min,得到扩大培养的菌种;
4)定向发酵
将步骤3)扩大培养的菌种转接入装有定向发酵培养基的发酵罐中,菌种与定向发酵培养基的体积比为1:12,保持罐温28℃,罐压0.5-0.7kPa,搅拌速率350rpm,通气量为1:
0.5~0.7v/v·m,发酵198小时,得到发酵液;
上述的定向发酵培养基中,以1L计算:麦芽粉11g、葡萄糖60g、FeSO40.25g、抗氧化剂
2.5g、天门冬氨酸3.3g、MgSO41g、KH2PO41g、复合维生素0.025g、吐温80 4g,余量为水,定向发酵培养基的pH为6.5;
5)提取桑黄活性多糖
将步骤4)得到的发酵液打到减压浓缩器中,浓缩至浓缩液的体积为原发酵液体积的
0.1~0.25倍,转移到贮罐中,经板框压滤,压滤清液浓缩,加入乙醇至乙醇在浓缩清液中的体积浓度达到60%~80%,低温醇析10~20小时,取沉淀物用去离子水溶解,喷雾干燥,得到桑黄活性多糖;
所述的抗氧化剂是维生素C或维生素P。