1.一种气相色谱-质谱联用检测脂肪酸含量的方法,其特征在于:包括以下步骤:
1)样品准备:将10mg动物组织剪碎后得样品,将样品置于螺口玻璃瓶中;
2)提取、皂化及甲酯化:将质量分数为37%的浓盐酸与2,2-二甲氧基丙烷按照0.02︰
0.98的体积比混合得浓盐酸2,2-二甲氧基丙烷溶液,向螺口玻璃瓶内的样品中分别加入
20μL质量浓度为1mg/mL的内标物石油醚溶液,以及1mL浓盐酸2,2-二甲氧基丙烷溶液,然后充氮气保护下震荡20min,震荡后用氮气将螺口玻璃瓶内的液体吹干,吹干后向螺口玻璃瓶内加入2.5mL质量分数为13%的三氟化硼甲醇溶液,然后将螺口玻璃瓶于80-85℃水浴中加热1小时;
3)加热结束后向螺口玻璃瓶内加入2.5mL去离子水,然后用石油醚萃取2次,取石油醚层,将石油醚层用无水Na2SO4干燥,干燥后过滤得滤液,将滤液减压浓缩至体积不再减少得检测样,向检测样充入氮气进行保护;
4)采用气相色谱-质谱联用仪对检测样内的脂肪酸进行测定;
5)数据分析及样品鉴定:经过步骤4)后,根据获得的原始光谱数据及质谱数据,计算检测样内各脂肪酸组分的相对含量以及绝对含量。
2.根据权利要求1所述一种气相色谱-质谱联用检测脂肪酸含量的方法,其特征在于:所述动物组织包括大脑、肝脏、肾脏、心脏、血液或肌肉组织。
3.根据权利要求2所述一种气相色谱-质谱联用检测脂肪酸含量的方法,其特征在于:所述动物组织的来源包括小鼠、大鼠、比格犬、恒河猴、猪、牛、鸡、鸭、鱼或人。
4.根据权利要求1所述一种气相色谱-质谱联用检测脂肪酸含量的方法,其特征在于:所述气相色谱的工作条件为:检测样溶于500μL正己烷后上样,进样量为1μL,进样方式为不分流,载气为流速1.5mL/min的氦气,升温程序为:初始温度为60℃,保持4min,然后以
5℃/min升至150℃,然后以4℃/min升至300℃,保持5min。
5.根据权利要求1所述一种气相色谱-质谱联用检测脂肪酸含量的方法,其特征在于:所述质谱的工作条件为:采用EI源、正离子检测,电子能量为70eV,离子源温度为230℃,单四级杆温度为150℃,扫描方式为全扫描方式,电子倍增器电压为1070V,溶剂延迟为
3.75min。
6.根据权利要求1所述一种气相色谱-质谱联用检测脂肪酸含量的方法,其特征在于:所述相对含量采用面积归一化方法进行计算。
7.根据权利要求1所述一种气相色谱-质谱联用检测脂肪酸含量的方法,其特征在于:所述绝对含量的计算方法为:脂肪酸组分对应的峰面积与内标物峰面积的比值乘以内标物的浓度。
8.根据权利要求7所述一种气相色谱-质谱联用检测脂肪酸含量的方法,其特征在于:所述内标物包括十五烷酸、十七烷酸、十九烷酸、二十一烷酸或二十三烷酸。