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专利号: 2012105784514
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种酶活性及热稳定性提高的脂肪氧合酶,其特征在于在GenBank PA1169公布的基因序列编码的脂肪氧合酶基础上,其N端氨基酸缺失。

2.权利要求1所述的脂肪氧合酶,其特征在于所述N端氨基酸缺失20个。

3.权利要求1所述的脂肪氧合酶,其特征在于所述N端氨基酸缺失30个。

4.一种获得权利要求1所述脂肪氧合酶的方法,其特征在于以GenBank PA119公布的基因为出发基因,将其编码脂肪氧合酶N端的序列进行缺失。

5.产权利要求1所述脂肪氧合酶的基因工程菌或转基因细胞系。

6.权利要求5所述产脂肪氧合酶基因工程菌的构建方法,其特征在于包括如下步骤:

1)采用化学全合成或PCR方法克隆编码权利要求1所述编码脂肪氧合酶的基因;

2)将步骤1)获得的基因连接到大肠杆菌表达载体,得到重组表达载体;

3)将步骤2)获得的重组表达载体转化E.coli Rosetta(DE3)得到基因工程菌。

7.权利要求6所述的基因工程菌,其特征在于所述表达载体为pET-22b(+)。

8.应用权利要求6所述基因工程菌发酵生产角蛋白酶的方法,其特征在于以所述脂肪氧合酶基因工程菌为生产菌株,37℃,培养12h,转接到TB培养基中,接种量为1%。菌体长到OD600为0.6时,加入IPTG诱导,并将培养温度降到20℃,培养50h。