1.一种罗丹明B ELISA检测方法,其特征在于,利用抗体1或抗体2分别与包被原1或包被原2组合,建立ELISA检测方法;
所述抗体1和抗体2是由免疫原1和免疫原2分别免疫新西兰大白兔得到的;
所述免疫原1和包被原1的制备方法为:将罗丹明B分别和BSA、OVA溶于磷酸盐缓冲溶液中,加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺,常温搅拌反应20~40min,将反应溶液用磷酸盐缓冲溶液透析即得目的产物罗丹明B-BSA和罗丹明B-OVA,罗丹明B-BSA为免疫原1,罗丹明B-OVA为包被原1;
所述免疫原2和包被原2的制备方法如下:为将罗丹明B异硫氰酸酯分别和BSA、OVA溶于碳酸盐缓冲溶液中,常温搅拌反应20~40min,将反应溶液用磷酸盐缓冲溶液透析即得目的产物罗丹明B异硫氰酸酯-BSA和罗丹明B异硫氰酸酯-OVA,罗丹明B异硫氰酸酯-BSA为免疫原2,罗丹明B异硫氰酸酯-OVA为包被原2。
2.根据权利要求1所述罗丹明B ELISA检测方法,其特征在于,利用抗体2和包被原1组合建立的罗丹明B ELISA检测方法灵敏度最高,特异性最强。
3.根据权利要求1所述罗丹明B ELISA检测方法,其特征在于,所述罗丹明B与BSA或OVA的质量份数比为80~120:1。
4.根据权利要求1所述罗丹明B ELISA检测方法,其特征在于,所述罗丹明B异硫氰酸酯与BSA或OVA的质量份数比为80~120:1。
5.根据权利要求1所述罗丹明B ELISA检测方法,其特征在于,所述1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺的用量按照与罗丹明B的质量份数比为1~8:1的比例确定。
6.根据权利要求1所述制备方法,其特征在于,所述磷酸盐缓冲溶液pH值为7.2~
7.6,浓度为0.01~0.1M/L。
7.根据权利要求1所述制备方法,其特征在于,所述碳酸盐缓冲溶液pH值为9.0~
9.8,浓度为0.01~0.1M/L。