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专利号: 201310203213X
申请人: 甘肃农业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 农业;林业;畜牧业;狩猎;诱捕;捕鱼
更新日期:2024-05-29
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种耐盐种质筛选方法,其特征在于包括如下步骤:

(1) 收集材料:收集3个玉米自交系材料;

(2) 种子精选与消毒:精选无破损、大小一致的种子,将3个玉米自交系分别用0.5%的次氯酸钠消毒10 min,用蒸馏水冲洗3-5次,用滤纸吸干附着水,得3个自交系玉米消毒种子;

(3) 盐胁迫下浸种:将3个玉米自交系消毒种子分别浸泡在0 mmol/L、60 mmol/L、140 mmol/L与220 mmol/L的NaC1溶液中12 h;得3个玉米自交系盐胁迫种子分别进入步骤4与步骤5;0 mmol/L即蒸馏水浸种处理为对照样品;

(4) 种子萌发:将步骤3所得的3个玉米自交系盐胁迫种子分别置于直径为12cm的培养皿中,双层滤纸作发芽床,每皿30粒;分别加入0 mmol/L、60 mmol/L、140 mmol/L与220 mmol/L的NaC1溶液,实验设3次重复;培养皿置于培养箱中25℃暗萌发;萌发期间每天补一次15ml对应浓度的盐溶液,待种子萌发处理4 d后,每个样品留取生长一致的10粒萌动+ +种子进入步骤6.1测定萌动种子的种皮、胚乳、胚的Na、K离子含量;

(5) 幼苗生长:将0 mmol/L、60 mmol/L、140 mmol/L与 220 mmol/L的NaC1溶液各

100 mL分别与500 g已灭菌的蛭石搅拌均匀,而后分装于15 cm×13 cm的营养钵中;将步骤3所得的3个玉米自交系盐胁迫种子,分别播在各对应盐浓度的消毒蛭石中,每钵30粒,进行胁迫处理,实验设3次重复;播种后置于植物生长室中培养,生长室的昼夜温度为2

25±2℃/20±2℃,每天光照12 h,光照强度为600 μmol/(s·m),相对湿度60-80%;期间,每隔1 d补加1次50 ml的去离子水,每3 d补加一次对应浓度的NaC1溶液50 ml,胁迫处理10 d后,待对照样品叶片生长到三叶一心时,每个样品留取生长一致的10株盐胁迫处理+ +幼苗进入步骤6.2测定幼苗根、茎、叶的Na、K离子含量;

(6) 离子含量测定

6.1将步骤4所得的萌动种子用60 mmol/L的NaCl溶液冲洗干净,将种皮、胚、胚乳分+ +离,置105℃烘箱中10 min,然后于80℃下烘48 h,而后用等离子质谱测定Na、K离子的含量;

6.2将步骤5所得的盐胁迫处理幼苗用60 mmol/L NaCl溶液冲洗干净,将根、茎、叶分+ +离,置105℃烘箱中10 min,然后于80℃下烘48 h,用等离子质谱测定根、茎、叶中Na、K离子的含量;

(7) 结果分析与筛选耐盐品种:对步骤6.1测得的萌动种子与步骤6.2测得的盐胁+ +迫处理幼苗的每个样品中Na、K离子的含量数据,采用Excel2007软件进行数据处理,所有实验数据统计分析SPSS16.0进行处理,试验结果用平均值±标准偏差(SD)表示,采用Duncan进行差异显著性多重比较,对各处理间的差异显著性进行分析;根据萌动种子与盐+ + + +胁迫处理幼苗的每个样品中Na、K离子的含量和K /Na比值的变化筛选耐盐品种。

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