1.一种含蟾皮转胶蛋白-2的抗肿瘤中药制剂在制备防治人体、动物、家禽肺癌细胞制剂中的应用,其特征在于该制剂采用以下方法制成:向严格灭菌后的干净容器内加入64g蒸馏水, 然后缓慢加入23g蟾皮转胶蛋白-2,混合均匀后再加入2g聚山梨酯和2g聚氧乙烯蓖麻油,搅拌半小时,再慢慢加人3g聚乙二醇、3g组氨酸、2g甘氨酸和1g甘油, 最后充分搅拌溶解均匀,冰箱冷藏保存即得最终产品;
所述的蟾皮转胶蛋白-2采用以下方法制备:
1)从蟾蜍皮肤cDNA质粒文库筛选,克隆到缺失部分5′-端开放阅读框碱基序列的蟾皮转胶蛋白-2 cDNA, cDNA的GenBank登录号为JX197456;
2)在原核表达系统一一大肠肝菌中表达和生产蟾皮转胶蛋白-2: 首先构建工 程菌并诱导表达,然后高密度发酵工程菌并诱导表达,包涵体分离和洗涤后,将目的蛋白质复性、纯化。
2.一种含蟾皮转胶蛋白-2的抗肿瘤中药制剂在制备防治人体、动物、家禽肺癌细胞制剂中的应用,其特征在于该制剂采用以下方法制成:向严格灭菌后的干净容器内加入58g无菌水, 然后缓慢加入25g蟾皮转胶蛋白-2,混合均匀后再加入1g聚山梨酯和5g葡聚糖,搅拌半小时,再慢慢加人11g甘油, 最后充分搅拌溶解均匀,冰箱冷藏保存即得最终产品;
所述的蟾皮转胶蛋白-2采用以下方法制备:
1)从蟾蜍皮肤cDNA质粒文库筛选,克隆到缺失部分5′-端开放阅读框碱基序列的蟾皮转胶蛋白-2 cDNA ,cDNA的GenBank登录号为JX197456;
2)在原核表达系统一一大肠肝菌中表达和生产蟾皮转胶蛋白-2: 首先构建工程菌并诱导表达,然后高密度发酵工程菌并诱导表达,包涵体分离和洗涤后,将目的蛋白质复性、纯化。
3.一种含蟾皮转胶蛋白-2的抗肿瘤中药制剂在制备防治人体、动物、家禽肺癌细胞制剂中的应用,其特征在于该制剂采用以下方法制成:向严格灭菌后的干净容器内加入61g去离子水, 然后缓慢加入24g蟾皮转胶蛋白-2,混合均匀后再加入5g聚氧乙烯蓖麻油,搅拌半小时,再慢慢加人2.5g聚乙二醇、2.5g组氨酸、2.5g甘氨酸和2.5g甘油, 最后充分搅拌溶解均匀,冰箱冷藏保存即得最终产品;
所述的蟾皮转胶蛋白-2采用以下方法制备:
1)从蟾蜍皮肤cDNA质粒文库筛选,克隆到缺失部分5′-端开放阅读框碱基序列的蟾皮转胶蛋白-2 cDNA,cDNA的GenBank登录号为JX197456;
2)在原核表达系统一一大肠肝菌中表达和生产蟾皮转胶蛋白-2: 首先构建工程菌并诱导表达,然后高密度发酵工程菌并诱导表达,包涵体分离和洗涤后,将目的蛋白质复性、纯化。