1.多壁碳-聚苯胺-壳聚糖/纳米金胶复合修饰免疫传感器的制备,其特征在于:一种新型的多壁碳-聚苯胺-壳聚糖纳米复合材料和纳米金胶的制备,制备步骤为:
1)多壁碳-聚苯胺-壳聚糖纳米复合膜的制备:
采用原位聚合的方法制备聚苯胺包裹的多壁碳纳米复合材料,苯胺单体在使用之前在低压真空下提纯,120mg多壁碳以及1g苯胺单体同时加入到20mL 1M 的盐酸溶液中,超声
2h形成均匀分散的溶液,然后将溶液置于冰浴搅拌,待溶液冷却后加入溶有过硫酸铵的盐酸溶液,其中过硫酸铵的物质的量与苯胺单体物质的量比例为1:1,为了能让苯胺单体完全聚合,溶液在0-5°C冰浴中持续恒力搅拌反应12h,聚合后的溶液抽滤收集产物,并依次用去离子水、甲醇和丙酮洗涤,最后真空干燥12h,将壳聚糖溶于1.0%的醋酸溶液中,配制成0.5% 壳聚糖溶液,室温下磁力搅拌至壳聚糖完全溶解,称取10mg多壁碳-聚苯胺加入到
10mL 0.5% 壳聚糖溶液中,超声分散8h得到分散均匀的多壁碳-聚苯胺-壳聚糖纳米复合液;
2) 纳米金胶的制备:
采用柠檬酸三钠热还原氯金酸的方法,所有的玻璃器皿均用王水浸泡过夜,再用
12mol/L的氢氧化钠水溶液浸泡2h,洗涤干净备用,将98mL去离子水和2mL 50mM氯金酸溶液混合,快速搅拌下加热至亚沸状态,即产生回流时,迅速加入10mL 38.8mM的柠檬酸三钠溶液,混合物加热至沸腾后,继续搅拌20min,这个过程中溶液由淡黄色转为无色,然后变灰黑色,最后成酒红色,除去热源后继续搅拌至室温下慢慢冷却,将冷却后的金胶溶液置于干净的棕色玻璃瓶中于4°C冰箱中避光保存备用,数月有效。
2.如权利要求1所述的多壁碳-聚苯胺-壳聚糖/纳米金胶复合修饰免疫传感器的制备,其特征在于:利用纳米金胶和多壁碳-聚苯胺-壳聚糖纳米复合膜协同作用共同修饰电极的免疫传感器制备步骤为:取7μL制备好的多壁碳-聚苯胺-壳聚糖纳米复合膜滴涂在预处理好的玻碳电极表面,常温下静置2h,用PH=7.5的磷酸盐缓冲液冲洗电极表面;电极表面晾干后,取7μL纳米金胶滴涂在电极表面,常温下静置1.5h,然后用PH=7.5的磷酸盐缓冲液冲洗表面,氮气吹干;将上述经纳米材料修饰好的电极沉浸在毒死蜱单克隆抗体溶液中,4°C条件下浸泡
8-12h,取出后用磷酸盐缓冲液冲洗表面,晾干待用;最后将上述制备好的电极浸于0.5%的牛血清蛋白溶液中,室温下静置2h,以封闭非特异性结合位点,取出置于室温下晾干,免疫传感器制作完成,保存在4°C条件下备用。