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专利号: 2013104220415
申请人: 陕西科技大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-02-28
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种黄姜皂素清洁生产方法,其特征在于,包括如下步骤: 1)将黄姜粉碎,然后过滤获得纤维渣和滤出物;将滤出物静置分为三层,上层为上清液,中层为悬浊液,下层为淀粉;倒出上清液备用;分离出下层淀粉并洗涤,将淀粉洗涤后的洗液并入悬浊液中得到悬浮液; 2)将悬浮液离心后得到悬浮液沉淀和悬浮液清液,将悬浮液清液用截留分子量为700Dalton的纳滤膜进行膜分离得到含薯蓣皂苷的保留液;将保留液与悬浮液沉淀混合,并调整得到固形物含量为4-6%的混合液,按比例在每100ml混合液中加入6-8ml蒺藜提取液、0.2-0.3g乙酸钠、0.3-0.5g柠檬酸氢二铵和0.008-0.012ml吐温80及0.4-0.6g酪蛋白水解物得到发酵培养基,将发酵培养基的pH值调至5.0-6.0,灭菌冷却后按发酵培养基体积的5-8%接种量接入嗜酸乳杆菌,在34-38°C下发酵培养2-3d进行生物转化将薯蓣皂苷为皂素; 3)将发酵结束后得到的发酵液的pH值调至6.5-7.5,然后离心分离得到发酵液清液和发酵液沉淀;将发酵液沉淀在50-60°C烘干,加入乙醇进行提取皂素后抽滤得到抽滤液和残渣; 4)用石油醚反复萃取抽滤液,静置分层,合并石油醚层,再浓缩结晶后得到黄姜皂素。

2.根据权利要求1所述的一种黄姜皂素清洁生产方法,其特征在于,步骤I)中采用80-100目的滤布进行过滤,滤出物静置5-6h后分成三层。

3.根据权利要求1所述的一种黄姜皂素清洁生产方法,其特征在于,步骤2)中悬浮液离心时的转速为3000-4000r/min,离心时间为10_15min ;灭菌时的温度为121°C,灭菌时间20_30mino

4.根据权利要求1所述的一种黄姜皂素清洁生产方法,其特征在于,步骤3)中发酵结束后用0.75-1.25mol/L的NaOH溶`液调节发酵液的pH值。

5.根据权利要求1所述的一种黄姜皂素清洁生产方法,其特征在于,步骤3)中发酵液离心分离时的转速为5000-7000r/min,离心时间为10_15min。

6.根据权利要求1所述的一种黄姜皂素清洁生产方法,其特征在于,步骤3)中对发酵液沉淀提取时,加入沉淀量2-4倍的乙醇提取3-4h完成皂素提取。

7.根据权利要求1所述的一种黄姜皂素清洁生产方法,其特征在于,步骤3)中将发酵液清液经截留分子量为700Dalton的纳滤膜进行膜分离得到含未转化的薯蓣皂苷的保留液,回收保留液用于下一次黄姜皂素生产时,步骤2)中的生物转化。

8.根据权利要求1所述的一种黄姜皂素清洁生产方法,其特征在于,步骤4)中用抽滤液体积1/3-1/2的石油醚反复萃取抽滤液至少3次。

9.根据权利要求1所述的一种黄姜皂素清洁生产方法,其特征在于,还包括对将步骤I)中得到的纤维渣和洗涤后的黄姜淀粉的加工处理,处理包括如下步骤: a.在纤维渣中加入质量分数分别为15-25%的麦麸、0.5-1.5%的硫酸铵和体积质量分数为0.08-0.12%的吐温80,并搅拌均匀,然后灭菌冷却到30-40°C再按体积质量分数为8-12%的接种量接入绿色木霉,恒温培养后,得到含纤维素酶和菌体蛋白的黄姜纤维渣; b.将黄姜淀粉用步骤I)中得到的上清液进行调浆,经液化、糖化获得黄姜淀粉的酶解液,将酶解液降温后,按比例在每升酶解液中加入8-12g的(NH4)2S04、3-7g的蛋白胨、`2.0-4.0g的无水乙酸钠、4-8g的柠檬酸氢二铵、0.8-1.2mL的吐温80、`0.2-0.4g的硫酸镁、.0.05-0.08g的硫酸锰和3.0-5.0g的磷酸氢二钾,搅拌均匀并调节pH值至5.5-6.5后得到酶解培养液,灭菌冷却后按比例在每100ml酶解培养液中接入3-5ml保拉迪酵母和5_7ml嗜酸乳杆菌,发酵后通过固液分离得到益生菌菌泥; c.将益生菌菌泥添加到含纤维素酶和菌体蛋白的黄姜纤维渣中,混合均匀并低温烘干后得到黄姜活性饲料。

10.根据权利要求9所述的一种黄姜皂素清洁生产方法,其特征在于,步骤a中灭菌时的温度为121°C,灭菌时间20-30min ;恒温培养时的温度为27_33°C,时间为3_5d ;步骤b中灭菌时的温度为121°C,灭菌时间20-25min ;发酵时的温度为33-39°C,发酵时间为48-60h。