1.一种毒素蛋白,其特征在于:所述毒素蛋白的N-端序列为:Glu-Ser-Ile-Gln-Thr-Ser-Thr-Tyr-Val-Pro-Asn-Thr-Pro-Asn-Gln-Lys-Phe-Asp-Tyr-Glu-Val-Gly-Lys-Asp-Tyr——。
2.根据权利要求1所述的毒素蛋白,其特征在于:所述毒素蛋白的分子量为28690。
3.一种如权利要求1或2所述的毒素蛋白的纯化方法,其特征在于:包括以下步骤:
a、卵粒提取物的制备:将间斑寇蛛的卵粒进行匀浆,离心后取上清液作为提取液,沉淀研磨后再次提取,重复2-5次,合并提取液,经冷冻干燥或浓缩后,得到卵粒提取物;
b、分子筛层析步骤:将卵粒提取物溶于磷酸缓冲液中,进行分子筛层析分离,通过磷酸缓冲液洗脱,得到洗脱峰,选择经SDS-PAGE检测出的目标峰作为分子筛层析后的目标峰;
c、离子交换层析步骤:将分子筛层析后的目标峰在阴离子交换层析柱上进行离子交换层析,得到洗脱峰,取穿过峰作为离子交换层析后的目标峰;
d、反相-高效液相层析步骤:采用C4反相柱将离子交换层析的目标峰进行脱盐和进一步纯化,收集经过SDS-PAGE确定的目标峰进行冷冻干燥,即得纯化的毒素蛋白。
4.根据权利要求3所述的毒素蛋白的纯化方法,其特征在于:步骤a中的匀浆在缓冲液或水中进行,其中缓冲液的浓度为0.04-1.06mol/L;离心过程具体为:在转速为
8000-10000r/min的条件下离心8-12分钟。
5.根据权利要求4所述的毒素蛋白的纯化方法,其特征在于:所述缓冲液的浓度为
0.05mol/L;离心时转速为10000r/min,离心时间为10分钟。
6.根据权利要求3所述的毒素蛋白的纯化方法,其特征在于:步骤b中用于分子筛层析的卵粒提取物用磷酸缓冲液配成浓度为2.0-2.8mg/ml的溶液;分子筛层析采用TMSephacryl S-200柱层析,规格为2.6cm×60cm;磷酸缓冲液洗脱时的流速为2-2.5ml/min,检测波长为280nm。
7.根据权利要求6所述的毒素蛋白的纯化方法,其特征在于:用于分子筛层析的卵粒提取物用磷酸缓冲液配成浓度为2.5mg/ml的溶液;磷酸缓冲液洗脱时的流速为2.5ml/min。
8.根据权利要求3所述的毒素蛋白的纯化方法,其特征在于:步骤c中的阴离子交换层析柱为Toyopearl DEAD-650E阴离子交换层析柱,规格为5mm×10cm;Tris-HCl缓冲液的浓度为48-52mmol/L,pH为8.0-8.6;梯度洗脱时氯化钠溶液的起始浓度为1-1.2mol/L。
9.根据权利要求8所述的毒素蛋白的纯化方法,其特征在于:所述Tris-HCl缓冲液的浓度为50mmol/L,pH为8.5;梯度洗脱时氯化钠溶液的起始浓度为1.0mol/L。
10.根据权利要求3所述的毒素蛋白的纯化方法,其特征在于:步骤d中脱盐和进一步纯化步骤中,C4反相柱的规格为4.6mm×250mm,采用洗脱液A和洗脱液B进行线性梯度洗脱,洗脱液A为0.05%的三氟乙酸,洗脱液B为含0.05%三氟乙酸的乙腈,洗脱过程中每分钟增加0.8-1.2%的洗脱液B,流速为0.7-1.0m/min,检测波长为280nm。