1.一种检测有机磷农药的乙酰胆碱酯酶传感器的制备方法,其特征在于:制备石墨烯- 纳米金复合物,滴涂在玻碳电极表面,然后滴涂煅烧类水滑石-乙酰胆碱酯酶混合物到石墨烯-纳米金复合物修饰的工作电极表面,制备检测有机磷农药的乙酰胆碱酯酶生物传感器;
所述乙酰胆碱酯酶传感器的具体制备步骤如下:
(1)将2.0 mg石墨烯加入到105 μL 0.01M HAuCl4·4H2O中,通过超声处理直到石墨烯分散均匀,然后将105 μL 0.01M的柠檬酸钠、10.0 mL乙醇和20.0 mL去离子水依次添加到上面的悬浮液中,将新鲜配制的125 μL 0.05M硼氢化钠溶液添加到上述混合物中,搅拌直到溶液颜色不再变化,然后再连续搅拌10 h,以16000 r/min的离心速度来使悬浮液分离,然后用去离子水洗涤几次,沉淀物在5 mL的pH值为7.5的磷酸盐缓冲溶液中再次分散,然后在4℃下存储在棕色瓶中;
(2)将 含 有 1.208 g的Cu(NO3)2·3H2O、3.846 g的 Mg(NO3)2·6H2O 和3.751g 的Al(NO3)3·9H2O的20 mL溶液在剧烈搅拌的条件下滴定到20 mL含有2.40 g NaOH和5.30 gNaHCO3的混合溶液中,产生的悬浮液在65℃下,搅拌1 h,得到的产物过滤并用去离子水清洗,直到溶液的pH为中性,然后在60℃下干燥两天,得到的产物为类水滑石,将制备好的类水滑石在马弗炉中500℃加热7 h,得到煅烧类水滑石,制备煅烧类水滑石-乙酰胆碱酯酶混合液,将煅烧类水滑石分散在去离子水中,搅拌一晚上制备煅烧类水滑石的悬浮液;
(3)将乙酰胆碱酯酶溶液与类水滑石悬浮液以1:1的体积比混合,得到煅烧类水滑石-乙酰胆碱酯酶混合液,将制备好的混合液储存在4℃的冰箱中,将5 μL的石墨烯-纳米金溶液滴涂在预先处理的玻碳电极上,在空气中干燥2 h,得到的石墨烯-纳米金玻碳电极用超纯水冲洗表面,将未固定在电极表面的复合物冲洗掉,然后滴涂5.0μL、100 mU的类水滑石-乙酰胆碱酯酶溶液的混合液,并在室温下干燥2 h,用pH为7.5的磷酸盐缓冲溶液冲洗去除未吸附上的酶,获得检测有机磷农药的乙酰胆碱酯酶生物传感器。