1.一种古代文物材料中胶原蛋白的检测方法，其特征在于利用竞争酶联免疫的方法来检测古代文物材料中的蛋白成分，即将AbCam兔抗Ⅰ型胶原蛋白多克隆抗体固定于固相载体上，加入样品洗脱液形成抗原抗体复合物；用PBS缓冲溶液洗涤后再加入碱性磷酸酯酶标记山羊抗兔IgG(H+L)，使其通过反应而结合在固相载体上，此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例；加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量成正相关，因此可根据呈色的深浅进行定性分析。

2.根据权利要求1所述的古代文物材料中胶原蛋白的检测方法，其特征在于步骤如下：a)溶液配制：PBS缓冲溶液的配制：KCl 0.2g，KH2PO4 0.2g，NaCl 8.0g，NaH2PO4·7H2O

2.16g,用去离子水溶解并定容1000mL，调节PH至7.4,121℃灭菌处理；洗脱液的配制：

5mL1mol/L三羟基甲基氨基甲烷-HCl缓冲溶液、1mL0.5mol/L的乙二胺四乙酸溶液、180g尿素、25mL20%十二烷基硫酸钠(50mL去离子水中含有10g溶质)，加去离子水溶解并定容至

500mL，用NaOH调节pH至7.4，无菌抽滤后在室温下储存；

b)将PBS缓冲溶液80-100μL设为空白对照，样品鱼胶粉0.1-0.5mg设为阳性对照；将

80-100μL的PBS缓冲溶液、0.1-0.5mg样品鱼胶粉和0.1-0.5mg的实验样品文物材料分别溶于80-120μL的洗脱液中，室温下放置2-4天，形成阳性对照样品鱼胶粉洗脱液和实验样品文物材料洗脱液；

c)取步骤b所述阴性PBS缓冲溶液、阳性对照样品鱼胶粉洗脱液和实验样品文物材料洗脱液各40-60μL，分别与0.1mol/L的NaHCO3溶液80-100μL混合并放置10分钟；

d)加60-80μL0.1mol/L NaHCO3溶液至ELISA板的实验孔内；

e)加10-30μL步骤c中得到的溶液到步骤d所述的ELISA板实验孔中；

f)用保鲜膜或石蜡膜封板，4℃冰箱内放置过夜后继续实验；

g)将ELISA板放置室温下使其温度回升至室温，去除ELISA板孔内样品；

h)用PBS缓冲溶液清洗ELISA板孔，每孔加入300μL，洗涤三次，每次三分钟；

i)去除步骤h的PBS缓冲溶液，每孔加300μL1%牛血清白蛋白（BSA）溶液，室温下封闭1h；

j)去除步骤i的封闭液，每孔添加80-120μL一抗即AbCam兔抗Ⅰ型胶原蛋白多克隆抗体，一抗的浓度稀释到1:3000到1:9000之间，室温下孵育2小时；

k)去除步骤j的抗体溶液，每孔加300μLPBS缓冲溶液，洗涤三次，每次三分钟；

l)去除步骤k的PBS缓冲溶液，每孔添加80-120μL二抗即碱性磷酸酯酶标记山羊抗兔IgG(H+L)，二抗的浓度稀释至1：10000到1:12000之间，室温下孵育2小时；

m)去除步骤l的抗体溶液，用PBS缓冲溶液清洗ELISA板孔，每孔加入300μLPBS缓冲溶液，洗涤三次，每次三分钟；

n)去除步骤m的PBS缓冲溶液，每孔加80-120μL10mmol/L的对硝基苯磷酸二钠溶液，待阳性对照反应完全,而阴性对照仍呈透明时，每孔加80-120μL0.75mol/L的NaOH溶液终止反应；

o)用酶标仪读取405nm处各孔处的吸光度数值OD；

p)比较空白对照样品鱼胶粉和实验样品文物材料的吸光度数值OD；与空白对照样品鱼胶粉检测的OD值相比，如果文物洗脱液中胶原蛋白检测实验OD值明显增加，证明实验文物材料中确实存在胶原蛋白；与空白对照样品鱼胶粉检测的OD值相比，如果文物洗脱液中胶原蛋白检测实验OD值无显著变化，证明实验样品文物材料中不存在胶原蛋白。