1.一种微藻油脂的提取方法,其特征在于包括以下步骤:
①取微藻培养液离心分离后,去除上清液并将获取的微藻进行冷冻干燥,取冻干藻粉于试管中待提取;
②将四氢呋喃∶氯仿∶正己烷按体积比为1∶0.8~1.5∶1~1.2配制混合溶液待用;
③用移液管移取步骤②配制的混合溶液,加入步骤①中盛有冻干后藻粉的试管中;
④将步骤③获得的藻粉与混合溶液的混合物料在超声波场中进行第一破碎过程,第一破碎过程中混合物料在超声波场中破碎3~5次,每一次持续时间为30~60s,每次间隔时间10~30s;
第一破碎过程完毕后离心分离,收集上清液后向离心分离得到的沉淀中加入新鲜的步骤②配制的混合溶液,进行第二破碎过程;第二破碎过程中混合物料在超声波场中破碎
3~5次,每一次持续时间为30~60s,每次间隔时间10~30s;
第二破碎过程完毕后离心分离,收集上清液;重复第二破碎过程1~2次,将各破碎过程结束后离心分离得到的上清液合并待处理;
⑤将步骤④合并的上清液倒入事先准备好的收集瓶中;对收集瓶进行抽真空操作,混合有机溶剂与从微藻中提取出来的油脂分离,收集瓶中剩余的液体即为从微藻中提取的油脂,从而完成微藻油脂的提取。
2.根据权利要求1所述的微藻油脂的提取方法,其特征在于:步骤③中每1g冻干后的藻粉加入步骤②配制的20~60mL混合溶液。
3.根据权利要求1所述的微藻油脂的提取方法,其特征在于:步骤⑤对收集瓶进行抽真空操作时,混合有机溶剂从收集瓶中抽出后进入抽真空装置出气端所连接的回收瓶中,混合有机溶剂收集后可重新用于步骤②至步骤④的破壁提取操作中。
4.根据权利要求1所述的微藻油脂的提取方法,其特征在于:步骤④中,超声破碎时超声波的频率为20~30kHz。