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专利号: 2014100948841
申请人: 宁波大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-02-23
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种海水环境中氯氰菊酯和/或溴氰菊酯降解菌,其特征在于:该菌为HS-10菌株,分类命名为假交替单胞菌(Pseudoalteromonas sp.),于2012年4月24日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No. 6044,该菌株的16S rDNA的Genbank登陆号为JX087926。

2.根据权利要求1所述的海水环境中氯氰菊酯和/或溴氰菊酯降解菌,其特征在于该菌株的生物学特征如下:革兰氏染色阴性,为杆菌,精氨酸双水解试验、赖氨酸脱羧酶试验、柠檬酸盐试验、鸟氨酸脱羧试验、尿素酶试验阳性,V-P反应、H2S反应、明胶液化实验阴性,可以利用蔗糖。

3.根据权利要求1所述的海水环境中氯氰菊酯和/或溴氰菊酯降解菌,其特征在于:

该菌株海水中生长,最适生长温度25-30 ℃,最适生长pH 为7.0-7.8,在固体培养基上,菌落圆形、凸起,边缘完整,呈灰白色,半透明。

4.一种根据权利要求1所述的海水环境中氯氰菊酯和/或溴氰菊酯降解菌的分离纯化方法,其特征在于具体包括如下步骤:(1)培养基配制

将氯氰菊酯和溴氰菊酯混合溶液加入到营养培养基中,使氯氰菊酯和溴氰菊酯终浓度均为100mg/L,得到富集培养液;

(2)降解菌分离纯化

取500mL海水样品无菌状态下过滤富集后,加入到含富集培养液的三角瓶中,于28℃、转速180 rpm的条件下,培养7d后,按10%体积接种量转移到新配制的富集培养液中,再在温度28 ℃、转速180 rpm的条件下,培养7d,重复上述步骤连续富集培养3次,取培养基发酵液进行平板划线分离、纯化,直到筛选得到单个菌落,将纯化后的各菌落分别接至富集培养液中振荡培养,在温度28℃、转速180 rpm的条件下,培养7 d,通过气相色谱-电子捕获器检测各富集培养液中拟除虫菊酯类农药残留量,最后筛选获得一株对氯氰菊酯和/或溴氰菊酯农药具有高效降解能力的菌株,即氯氰菊酯和/或溴氰菊酯降解菌HS-10菌株。

5.一种根据权利要求4所述的海水环境中氯氰菊酯和/或溴氰菊酯降解菌的分离纯化方法,其特征在于所述的营养培养基配制方法如下:精确称取磷酸高铁0.01g、蛋白胨

5.0g、酵母膏1.0g,加入过滤海水1000mL,混合均匀后,调节pH 为7.0-7.8,于121℃高压蒸汽灭菌20min后制得。

6.一种根据权利要求1海水环境中氯氰菊酯和/或溴氰菊酯降解菌的应用,其特征在于:该菌株对氯氰菊酯和/或溴氰菊酯具有较高的生物降解能力,可用于氯氰菊酯和/或溴氰菊酯农药污染的海水及沉积物环境的生物修复。

7.根据权利要求6所述的海水环境中氯氰菊酯和/或溴氰菊酯降解菌的应用,其特征在于:该菌株在温度25-30℃、pH 7.0-7.8、氯氰菊酯和溴氰菊酯农药浓度均为100mg/L 的条件下,7d 后对海水中氯氰菊酯和溴氰菊酯的降解率分别达到75.6%和90.9% 以上。

8.根据权利要求6所述的海水环境中氯氰菊酯和/或溴氰菊酯降解菌的应用,其特征在于:该菌株在温度25-30℃、pH 7.0-7.8、氯氰菊酯农药浓度为100mg/L 的条件下,7d 后对海水中氯氰菊酯的降解率达到75.6% 以上。

9.根据权利要求6所述的海水环境中氯氰菊酯和/或溴氰菊酯降解菌的应用,其特征在于:该菌株在温度25-30℃、pH 7.0-7.8、溴氰菊酯农药浓度为100mg/L 的条件下,7d 后对海水中溴氰菊酯的降解率达到90.9% 以上。