1.一种鸡胚蛋卵黄高磷蛋白磷酸肽的提取方法,其特征在于步骤如下:
(1)受精鸡蛋孵化:精选无损健康的受精鸡蛋,放入孵化箱内进行孵化;待孵化12-15天,取出鸡胚蛋,放入低温环境中结束其生命并保存,以备加工用;
(2)提取卵黄高磷蛋白:对步骤(1)所得鸡胚蛋表面进行消毒,去除蛋壳取出鸡胚胎,将鸡胚胎用组织匀浆机粉碎,并用无菌水稀释,调节pH 3~6,且充分搅拌得匀浆液;之后将匀浆液在3000g条件下离心20min,收集沉淀物,用正己烷和乙醇按3:1的体积比混合后形成的混合液充分脱脂,并过滤;将过滤得到的截留物用1-2 M的 NaCl溶液充分溶解,随后在60℃条件下保持10 min以去除热不稳定蛋白,之后再次在3000g条件下离心20min,收集上层清液,即得到卵黄高磷蛋白;
(3)酶解卵黄高磷蛋白:将步骤(2)得到的卵黄高磷蛋白用蛋白酶在最适pH条件下进行水解,并辅以超高压辅助处理条件为100~150MPa,温度40~43℃,时间10~15min;之后用5 kDa的超滤膜在4℃下进行超滤,收集超滤得到小分子组分;
(4)后处理:将步骤(3)所得超滤组分用冷冻干燥机进行冷冻干燥,冷冻干燥压强参数为20~25pa,温度为-35~-30℃,收集冷冻后所得产物,即得鸡胚蛋卵黄高磷蛋白磷酸肽。
2.根据权利要求1所述鸡胚蛋卵黄高磷蛋白磷酸肽的提取方法,其特征在于:步骤(3)所述水解用蛋白酶为胰蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶中的一种或几种的复合酶。