1.一种三阶段混菌固态发酵制备酒糟蛋白饲料的方法,其特征是:
(1)第一阶段混菌固态发酵
以100重量份新鲜丢糟为底物,石灰调节pH值6.5,接入10% A组芽孢杆菌组合种子菌液,混匀装入麻袋,堆积发酵自然升温到60~65℃后,倒出麻袋平摊生产场地降温到45℃,再堆积发酵升温到60℃,采用翻堆、堆积、平摊方式维持发酵温度在55~60℃之间,经2~
3d发酵后,得到酒糟醅料;
(2)第二阶段混菌固态发酵
在第一阶段发酵结束的100重量份酒糟醅料中分别加入15~18%重量份槐树叶粉、
10~12%重量份杨树叶粉、10~12%重量份麸皮、0.15%重量份磷酸氢二钾、0.1%重量份硫酸镁和2%重量份硫酸铵,同时在接入6%重量份白地霉二级种子菌液、6%重量份热带假丝酵母二级种子菌液、6%重量份康宁木霉的二级种子菌液,加水调节为含水量60~65%,混匀、扬散后制成发酵醅料;
将发酵醅料直接在生产场地堆积发酵,发酵温度控制在32℃~34℃之间,堆积发酵时间6d,发酵过程采用翻堆、堆积、平摊方式维持发酵温度32℃~34℃之间;
(3)第三阶段混菌固态发酵
在第二阶段混菌固态发酵得到的100重量份发酵醅料中,分别接入12~18%B组芽孢杆菌组合种子菌液,在生产场地堆积发酵自然升温到60℃后,平摊降温至45~50℃,再堆积发酵,采用翻堆、堆积、平摊方式维持发酵温度50~60℃之间,堆积发酵时间2d,得到新鲜酒糟蛋白饲料;
经第三阶段混菌固态发酵得到新鲜酒糟蛋白饲料,以55~65℃通风烘干、粉碎后,输送到造粒机制备成颗粒酒糟蛋白饲料。
2. 根据权利要求1所述的一种三阶段混菌固态发酵制备酒糟蛋白饲料的方法,其特征是所述的A组芽孢杆菌组合种子菌液,其制备过程如下:(1)从斜面试管中挑出地衣芽孢杆菌20166,接入芽孢杆菌种子培养基,调节pH值为
6.8,培养温度34℃,摇瓶转速为200r/min,培养时间36h,得到地衣芽孢杆菌20166一级种子菌液;
(2)将地衣芽孢杆菌20166一级种子菌液接入芽孢杆菌种子培养基,接种量为芽孢杆菌种子培养基重量的10%,调节pH值为6.0,培养温度34℃,通气量0.05~0.1m3/(m3·min),培养时间96h,得到地衣芽孢杆菌20166二级种子菌液;
(3)从斜面试管中挑出短小芽孢杆菌10440,接入芽孢杆菌种子培养基,调节pH值为
6.8,培养温度34℃,摇瓶转速为200r/min,培养时间36h,得到短小芽孢杆菌10440一级种子菌液;
(4)将短小芽孢杆菌10440一级种子菌液接入芽孢杆菌种子培养基,接种量为芽孢杆菌种子培养基重量的10%,调节pH值为6.0,培养温度34℃,通气量0.05~0.1m3/(m3·min),培养时间96h,得到短小芽孢杆菌10440二级种子菌液;
将地衣芽孢杆菌20166二级种子菌液与短小芽孢杆菌10440二级种子菌液按照重量份
3:1的比例配成A组芽孢杆菌组合种子菌液。
3.根据权利要求1所述的一种三阶段混菌固态发酵制备酒糟蛋白饲料的方法,其特征是所述的B组芽孢杆菌组合种子菌液,其制备过程如下:(1)斜面试管中挑出枯草芽孢杆菌枯草亚种20872,接入芽孢杆菌种子培养基,调节pH值为6.8,培养温度34℃,摇瓶转速为200r/min,培养时间36h,得到枯草芽孢杆菌枯草亚种20872一级种子菌液;
(2)将枯草芽孢杆菌枯草亚种20872一级种子菌液接入芽孢杆菌种子培养基,接种量为芽孢杆菌种子培养基重量的10%,调节pH值为6.0,培养温度34℃,通气量0.05~0.1m3/(m3·min),培养时间96h,得到枯草芽孢杆菌枯草亚种20872二级种子菌液;
(3)斜面试管中挑出枯草芽孢杆菌22974,接入芽孢杆菌种子培养基,调节pH值为6.8,培养温度34℃,摇瓶转速为200r/min,培养时间36h,得到枯草芽孢杆菌22974一级种子菌液;
(4)将枯枯草芽孢杆菌22974一级种子菌液接入芽孢杆菌种子培养基,接种量为芽孢杆菌种子培养基重量的10%,调节pH值为6.0,培养温度34℃,通气量0.05~0.1m3/(m3·min),培养时间96h,得到枯草芽孢杆菌22974二级种子菌液;
将枯草芽孢杆菌枯草亚种20872二级种子菌液与枯草芽孢杆菌22974二级种子菌液按照重量份1:4的比例配成B组芽孢杆菌组合种子菌液。
4.根据权利要求1所述的一种三阶段混菌固态发酵制备酒糟蛋白饲料的方法,其特征是所述的热带假丝酵母二级种子菌液,其制备过程如下:(1)斜面试管中挑出热带假丝酵母1254,接入热带假丝酵母种子培养基,调节pH值为
6.8,培养温度34℃,摇瓶转速为200r/min,培养时间36h,得到热带假丝酵母1254一级种子菌液;
(2)将热带假丝酵母1254一级种子菌液接入热带假丝酵母种子培养基,接种量为热带假丝酵母种子培养基重量的10%,调节pH值为6.0,培养温度34℃,通气量0.05~0.1m3/(m3·min),培养时间96h,得到热带假丝酵母1254二级种子菌液。
5.根据权利要求1所述的一种三阶段混菌固态发酵制备酒糟蛋白饲料的方法,其特征是所述的白地霉二级种子菌液,其制备过程如下:(1)斜面试管中挑出白地霉1315,接入白地霉种子培养基,调节pH值为6.8,培养温度
34℃,摇瓶转速为200r/min,培养时间36h,得到白地霉1315一级种子菌液;
(2)将白地霉1315一级种子菌液接入白地霉种子培养基,接种量为白地霉种子培养基重量的10%,调节pH值为6.0,培养温度34℃,通气量0.05~0.1m3/(m3·min),培养时间
96h,得到白地霉1315二级种子菌液。
6.根据权利要求1所述的一种三阶段混菌固态发酵制备酒糟蛋白饲料的方法,其特征是所述的康宁木霉13037种子菌液,其制备过程如下:(1)从茄子瓶中刮下康宁木霉13037孢子粉,接入康宁木霉种子培养基,调节pH值为
6.8,培养温度34℃,摇瓶转速为200r/min,培养时间36h,得到康宁木霉13037一级种子菌液;
(2)将康宁木霉13037一级种子菌液接入康宁木霉种子培养基,接种量为康宁木霉种子培养基重量的10%,调节pH值为6.0,培养温度34℃,通气量0.05~0.1m3/(m3·min),培养时间96h,得到康宁木霉13037二级种子菌液。
7.根据权利要求1所述的一种三阶段混菌固态发酵制备酒糟蛋白饲料的方法,其特征是所述的芽孢杆菌种子培养基,其制备过程如下:以酒糟降解液100重量份为基础,添加葡萄糖1.21%,蛋白胨2.67%和酵母浸粉1.55%;调节初始pH值为7.0。
8.根据权利要求1所述的一种三阶段混菌固态发酵制备酒糟蛋白饲料的方法,其特征是所述的热带假丝酵母种子培养基,其制备过程如下:以酒糟降解液100重量份为基础,添加葡萄糖 1.56%,蛋白胨1.88%和酵母浸粉0.77%;调节初始pH值为6.0。
9.根据权利要求1所述的一种三阶段混菌固态发酵制备酒糟蛋白饲料的方法,其特征是所述的白地霉种子培养基:以酒糟降解液100重量份为基础,添加葡萄糖1.33%,蛋白胨
2.50%和酵母浸粉0.71%;调节初始pH值为4.5。
10.根据权利要求1所述的一种三阶段混菌固态发酵制备酒糟蛋白饲料的方法,其特征是所述的康宁木霉种子培养基:以酒糟降解液100重量份为基础,添加葡萄糖 1.56%,蛋白胨1.88%和酵母浸粉0.77%;调节初始pH值为6.0。
11.根据权利要求1所述的一种三阶段混菌固态发酵制备酒糟蛋白饲料的方法,其特征是所述的酒糟降解液:取100重量份刚出窖的丢糟装入搅拌罐,加丢糟50%的重量份的
50℃热水,加入由20%淀粉酶、20%糖化酶、40%蛋白酶、20%纤维素酶组分混合而成的复合酶,搅拌混合,酶解最适条件为:复合酶用量0.60 g/l00g丢糟,温度50℃,pH6.0。维持品温经过4小时降解,沉淀4~6小时,取上清液待用成酒糟降解液。
12.根据权利要求1所述的一种三阶段混菌固态发酵制备酒糟蛋白饲料的方法,其特征是所述的槐树叶粉,其制备过程如下:取晒干的槐树叶,经过饲料粉碎机粉碎过筛40目成槐树叶粉。
13.根据权利要求1所述的一种三阶段混菌固态发酵制备酒糟蛋白饲料的方法,其特征是所述的杨树叶粉,其制备过程如下:取晒干的杨树叶,经过饲料粉碎机粉碎过筛40目成杨树叶粉。