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专利号: 201410216379X
申请人: 陕西科技大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-02-23
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种低能离子注入介导Ri质粒转化诱导黄芩毛状根的方法,其特征在于,包括以下步骤:1)将黄芩外植体转接到含50~200μg/mL乙酰丁香酮的MS固体培养基中,转接后于25~28℃黑暗培养2~3天,培养后用无菌水将黄芩外植体表面的培养基冲洗干净,冲洗干净后将黄芩外植体表面的无菌水用无菌风吹干,吹干后在黄芩外植体上划痕;2)经过步骤1)后,将黄芩外植体放置于离子注入机的真空靶室内,然后对黄芩外植体进行低能离子注入;所述离子注入的条件为:以N+作为注入离子,注入剂量为2 .5×1016~3 .5×1016ions/cm2,注入能量为25~30KeV,脉冲时间为5~10s,间隔时间为5~10s,真空度为1 .5~2.0×10-4Pa;3)将经过低能离子注入的黄芩外植体浸泡入含Ri质粒的TE缓冲溶液中并进行避光温育,温育的时间为2~4h,温育的温度为25~28℃,然后将黄芩外植体接种于含0.1~0.5mg/L吲哚-3-丁酸的MS固体培养基中,接种后于25~28℃黑暗培养21~25天诱导出毛状根。2.根据权利要求1所述一种低能离子注入介导Ri质粒转化诱导黄芩毛状根的方法,其特征在于:所述黄芩外植体为切成0.5~1.0cm的黄芩带节茎段的碎段。3.根据权利要求1所述一种低能离子注入介导Ri质粒转化诱导黄芩毛状根的方法,其特征在于:所述含Ri质粒的TE缓冲溶液中Ri质粒的浓度为≥200μg/mL。