欢迎来到知嘟嘟! 联系电话:13095918853 卖家免费入驻,海量在线求购! 卖家免费入驻,海量在线求购!
知嘟嘟
我要发布
联系电话:13095918853
知嘟嘟经纪人
收藏
专利号: 2014102334774
申请人: 浙江海洋学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 有机化学〔2〕
更新日期:2024-08-26
缴费截止日期: 暂无
价格&联系人
年费信息
委托购买

摘要:

权利要求书:

1.一种贻贝蒸煮液活性肽,其特征在于该活性肽的氨基酸序列为Pro-Arg-Ser-Arg-Phe,分子量为m/z 661.75 Da。

2.一种权利要求1所述的贻贝蒸煮液活性肽的制备方法,其特征在于包括以下步骤:

1)取适量贻贝蒸煮液加入到反渗透膜系统中,于压力2.0~3.0 MPa、温度20~30 ℃、流速0.5~1.0 m/s处理,得贻贝浓缩蒸煮液,贻贝浓缩蒸煮液喷雾干燥得蒸煮液固体粉末;

2)将制备的贻贝蒸煮液固体粉末按照1g:10~15 mL加入到甘氨酸–NaON缓冲液中,调pH至9.0~10.0,于45~55 ℃保温10~15 min,按照贻贝蒸煮液固体粉末质量的0.5~1.0 %加入蛋白酶,酶解3~5 h;

3)将酶解液加热到90~95℃灭酶活10~15 min,4500~6000 r/min离心25~30 min,取上清液;上清液依次经超滤和层析,得活性肽;

所述步骤2)中的蛋白酶为碱性蛋白酶,酶活力≥1.9×105 U/g。

3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于所述步骤1)中的贻贝为紫贻贝、厚壳贻贝,或者翡翠贻贝。

4.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于所述步骤1)中的反渗透膜为三醋酸纤维复合膜。

5.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于所述步骤3)的超滤和层析的具体过程为:超滤:将上清液调至pH 6.5~7.0,采用1 kDa的超滤膜进行超滤处理,收集分子量小于1 kDa组分,即超滤酶解液;

层析:将上述超滤酶解液用超纯水配成20~25 mg/mL的溶液,经凝胶柱层析分离,用双蒸水进行洗脱,根据280 nm下的吸光度曲线收集洗脱组分,其中,羟基自由基清除活性最高组分为凝胶层析酶解物,将上述凝胶层析酶解物用超纯水配成30~50 μg/mL的溶液,利用反相高效液相色谱进行纯化,根据羟基自由基清除活性得1个高活性抗氧化肽Pro-Arg-Ser-Arg-Phe。

6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于所述凝胶为葡聚糖凝胶LH-20;所述反相高效液相色谱条件为:进样量20~25 μL;色谱柱为规格是250×4.6mm,5 μm 的ZORBAX Eclipse Plus C18;柱温为20~25 ℃;流动相:20%的含0.1%三氟乙酸的乙腈;洗脱速度1.0 mL/min;紫外检测波长280 nm。

7.一种权利要求1所述的贻贝蒸煮液活性肽的用途,其特征在于用作制备抗氧化保健食品的用途。