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专利号: 2014102695240
申请人: 江汉大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种推断人体死后间隔时间的方法,其特征在于,所述方法包括:提取不同死亡时间的人的胆囊粘膜上皮细胞作为样本,并将所述样本涂片;

将涂片后的所述样本进行染色;

对染色后的所述样本进行图像分析,所述分析的参数包括:所述胆囊粘膜上皮细胞的细胞核的异形指数、灰度参数和几何参数,所述灰度参数包括平均光密度、平均灰度和积分光密度;

将所述参数进行统计,获得所述参数的线性回归方程,所述线性回归方程为:YID=11.333XID-33.338,其中,YID为推断的死后间隔时间,XID为对应测量的异形指数;

YAG=0.679XAG-54.277,其中,YAG为推断的死后间隔时间,XAG为对应测量的平均灰度;

YAOD=-178.868XAOD+84.222,其中,YAOD为推断的死后间隔时间,XAOD对应测量的平均光密度;

YIOD=-6.422X IOD+91.398,其中,YIOD为推断的死后间隔时间,XIOD为对应测量的积分光密度;

根据所述线性回归方程中的一个或多个确定死后间隔时间。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述样本剪取自所述人死后5~36h的所述胆囊粘膜上皮细胞。

3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述涂片的方法为:将取出的所述样本置于含有400mg/L的庆大霉素的生理盐水中,首次剪取所述样本的时间在所述人死后5h完成,在18℃恒温箱中存放0.5h,然后在保湿盒内,剪取0.5cm×0.5cm×1cm所述样本1份,且每隔1h剪取一次,将剪取的所述样本浸于清水中洗涤,取出所述样本并用滤纸吸干,将吸干后的所述样本涂布。

4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,将涂布后的所述样本采用孚尔根染色方法进行染色。

5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述孚尔根染色方法包括:将备染的所述涂片浸入固定液中固定0.5h,取出后置于6N盐酸溶液中水解30min,取出后置于蒸馏水中洗涤,再浸入由副品红配制的席夫氏试剂中放置30min,用浓度为0.5%的偏重亚硫酸钠溶液浸洗2min,重复浸洗三次,流水冲洗5min后,进行封片。

6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述固定液为卡诺氏固定液。

7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述图像分析采用彩色病理图像分析系统。

8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,在显微镜高倍物镜下摄取染色后的所述涂片的图像视野,以“弓”字型的形状作为采集线路,保证采集的图像无重复、无交叉,且每张所述涂片随机取10个视野,每个视野采集一幅图像。

9.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述几何参数包括面积、平均直径、等效直径和周长。