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专利号: 2014102703995
申请人: 浙江工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 有机化学〔2〕
更新日期:2023-12-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种利用高速逆流色谱分离纯化制备丹酚酸B和迷迭香酸的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)将丹参药材粉碎成粗粉,加入体积分数10%-95%的乙醇水溶液中,加热至回流提取数次,提取液趁热过滤,冷却,滤液减压除去溶剂,得到乙醇提取物;

(2)丹酚酸B、迷迭香酸的富集:将步骤(1)得到的乙醇提取物加入填充有大孔吸附树脂的色谱柱中,用水和甲醇或乙醇的混合溶剂梯度洗脱,收集含有丹酚酸B和迷迭香酸的洗脱液,减压回收溶剂,干燥、得到丹酚酸B和迷迭香酸的混合粗提物;

(3)丹酚酸B、迷迭香酸的纯化:以体积比为3:7:1:9的溶剂A、溶剂B、溶剂C、溶剂D组成高速逆流溶剂体系,将所述高速逆流溶剂体系混合充分后静置,按上下两相分开,取上相为固定相,下相为流动相,将固定相充满高速逆流色谱仪的多层线圈分离柱,设定高速逆流色谱仪,在500~1000r/min转速下,以0.5~5ml/min的流速注入流动相,取步骤(2)得到的丹酚酸B和迷迭香酸的混合粗提物,用上相、下相体积比1:1的混合溶剂溶解后进样,分别收集丹酚酸B的流出液和迷迭香酸的流出液,浓缩、干燥,得到丹酚酸B、迷迭香酸;

所述溶剂A为正己烷,所述溶剂B为乙酸乙酯,所述溶剂C为乙醇,所述溶剂D为水;

步骤(1)中,乙醇溶剂的体积用量以粗粉的质量计为5~20L/kg,每次回流提取的时间为30-60min,提取次数为1-3次;

步骤(1)中,所述乙醇溶剂为体积分数50%的乙醇溶剂;

步骤(2)中,所述大孔吸附树脂为D101、AB-8或HPD300大孔吸附树脂;

步骤(2)中,所述梯度洗脱条件为先用2-6倍柱体积的水洗脱,再用2-6倍柱体积的体积分数10%-30%乙醇或甲醇的水溶液洗脱,再用2-6倍柱体积的体积分数20%-40%乙醇或甲醇水溶液洗脱,再用2-6倍柱体积的体积分数30%-50%乙醇或甲醇水溶液洗脱,再用2-6倍柱体积的体积分数40%-60%乙醇或甲醇水溶液洗脱,再用2-6倍柱体积的体积分数

50%-95%乙醇或甲醇水溶液洗脱。

2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(3)中,所述的高速逆流色谱仪中采用波长190-380nm的紫外检测器检测,根据紫外检测器光谱图的峰形对流出液进行区分。

3.如权利要求2所述的方法,其特征在于步骤(3)中,所述紫外检测器的波长为254~

300nm。