1.一种利用腈水解酶工程菌制备1-氰基环己基乙酸的方法,其特征在于所述方法为:将含重组腈水解酶基因的工程菌经发酵培养后的培养液离心,以湿菌体作为催化剂,以
1-氰基环己基乙腈为底物,以pH值为3.0~10.0的缓冲液为反应介质,在25~70℃进行转化反应,反应结束后,获得含1-氰基环己基乙酸的混合液,将混合液分离纯化,获得1-氰基环己基乙酸;所述含重组腈水解酶基因的工程菌是由SEQ ID NO.2所示核苷酸序列编码基因构建而成。
2.如权利要求1所述利用腈水解酶工程菌制备1-氰基环己基乙酸的方法,其特征在于所述底物初始浓度为0.02~1mol/L,所述湿菌体的质量终浓度为10~100g/L。
3.如权利要求1所述利用腈水解酶工程菌制备1-氰基环己基乙酸的方法,其特征在于所述催化剂按如下方法制备:将含腈水解酶基因的工程菌接种至含终浓度50mg/L卡那霉素的LB液体培养基中,37℃培养10~12小时,获得种子液;随即将种子液以体积浓度2%的接种量接种至含终浓度50mg/L卡那霉素的LB液体培养基中,37℃培养至培养液的OD600为0.6~0.8,向培养液中加入终浓度为0.1mM的IPTG,28℃诱导培养10小时,将培养液离心,取沉淀水洗,获得湿菌体即为催化剂;所述LB液体培养基组成为:10g/L胰蛋白胨,5g/L酵母提取物,10g/L氯化钠,溶剂为水,pH值为7。
4.如权利要求1所述利用腈水解酶工程菌制备1-氰基环己基乙酸的方法,其特征在于所述转化反应介质为pH值为7的磷酸缓冲液。
5.如权利要求1所述利用腈水解酶工程菌制备1-氰基环己基乙酸的方法,其特征在于所述转化反应温度为35℃。