1.一种蛋白质单分子水平安培免疫分析方法,其特征在于,包括以下步骤:
①以免疫电极为工作电极,在工作电极上以纳米金标记物为中心,进行金标银染和原电池置换反应的多次反应,通过银染层和金盐的原电池置换反应,选择性地放大纳米金标记物的尺寸,可显著增大银染量和放大金属标记物电化学分析信号;
②将这种多重放大的方法用于电化学免疫分析,用原位阳极溶出伏安法获得该工作电极上所富集到的金属层的阳极溶出电流信号,从而间接实现样品中目标分析物的定量分析,使得电化学方法可以检测低至单分子水平的蛋白质。
2.根据权利要求1所述的蛋白质单分子水平安培免疫分析方法,其特征在于,所述金盐为能置换银染层的金盐溶液。
3.根据权利要求2所述的蛋白质单分子水平安培免疫分析方法,其特征在于,所述金盐的浓度为1 μmol/L稀溶液~饱和溶液。
4.根据权利要求2或3所述的蛋白质单分子水平安培免疫分析方法,其特征在于,所述金盐为氯金酸、氯金酸钾、氯金酸钠、亚硫酸金钠或者亚硫酸金钾。
5.根据权利要求4所述的蛋白质单分子水平安培免疫分析方法,其特征在于,所述金盐的浓度为1μmol/L~0.1mol/L。
6.根据权利要求1所述的蛋白质单分子水平安培免疫分析方法,其特征在于,所述金盐为1μL ~ 10mL体积的能置换银染层的溶液。
7.根据权利要求1、2、3、5或6所述的蛋白质单分子水平安培免疫分析方法,其特征在于,所述纳米金标记物的制备步骤为:将金纳米粒子与生物配体结合成生物复合物,所述生物配体为抗原或蛋白质。
8.根据权利要求4所述的蛋白质单分子水平安培免疫分析方法,其特征在于,所述纳米金标记物的制备步骤为:将金纳米粒子与生物配体结合成生物复合物,所述生物配体为抗原或蛋白质。
9.根据权利要求7所述的蛋白质单分子水平安培免疫分析方法,其特征在于,所述蛋白质为抗体。
10.根据权利要求8所述的蛋白质单分子水平安培免疫分析方法,其特征在于,所述蛋白质为抗体。
11.根据权利要求1、2、3、5或6所述的蛋白质单分子水平安培免疫分析方法,其特征在于,使用阳极溶出伏安法对金属离子进行定量分析时,采用1组,2组或2组以上电极,每组电极之间形成一个测量通道;每组电极为两电极或三电极体系。
12.根据权利要求4所述的蛋白质单分子水平安培免疫分析方法,其特征在于,使用阳极溶出伏安法对金属离子进行定量分析时,采用1组,2组或2组以上电极,每组电极之间形成一个测量通道;每组电极为两电极或三电极体系。
13.根据权利要求7所述的蛋白质单分子水平安培免疫分析方法,其特征在于,使用阳极溶出伏安法对金属离子进行定量分析时,采用1组,2组或2组以上电极,每组电极之间形成一个测量通道;每组电极为两电极或三电极体系。
14.根据权利要求1、2、3、5、6、8或9所述的蛋白质单分子水平安培免疫分析方法,其特征在于,所述金标银染和原电池置换反应的次数为1~10次。
15.根据权利要求4所述的蛋白质单分子水平安培免疫分析方法,其特征在于,所述金标银染和原电池置换反应的次数为1~10次。
16.根据权利要求7所述的蛋白质单分子水平安培免疫分析方法,其特征在于,所述金标银染和原电池置换反应的次数为1~10次。
17.根据权利要求11所述的蛋白质单分子水平安培免疫分析方法,其特征在于,所述金标银染和原电池置换反应的次数为1~10次。