1.纳米羟基磷灰石-基因-药物复合物,其特征在于所述复合物由纳米羟基磷灰石、抗肿瘤基因、抗肿瘤药物组成,所述纳米羟基磷灰石尺寸为20-300nm,纳米羟基磷灰石表层由聚乙烯亚胺覆盖,所述纳米羟基磷灰石表层的聚乙烯亚胺为分枝状,其分子量为8900-
120000Da,
所述基因为抗肿瘤基因,所述药物为抗肿瘤药物;
该纳米羟基磷灰石-基因-药物复合物的制备方法,其特征在于包括如下步骤:
1)将钙盐溶液于0-4℃冷却,逐滴加入等体积磷酸盐溶液,并维持100-300rpm/min搅拌,待滴加完成后,持续搅拌0.5-5h;钙盐溶液终浓度为1-10mmol/L,磷酸盐溶液终浓度为
0.5-7mmol/L;
2)在步骤1)反应体系中缓慢滴加碳酸氢钠溶液,持续搅拌0.5-5h,其中,碳酸氢钠溶液的滴加量为步骤1)中钙盐溶液体积的0.004-0.01倍;碳酸氢钠溶液终浓度为0.2-1.2mmol/L;
3)用氨水缓慢调节反应体系的pH值至10-13,调节完成后持续搅拌0.5-5h;
4)缓慢滴加与步骤2)中碳酸氢钠溶液等体积的聚乙二醇-400溶液,持续搅拌0.5-5h;
5)将步骤4)反应体系升温至90℃,持续搅拌0.5-5h;
6)停止加热,待反应体系降温至室温后,分别用去离子水和无水乙醇以离心方式各洗涤沉淀2-3次;
7)用去离子水重悬步骤6)得到的沉淀,加入聚乙烯亚胺溶液涡旋震荡混匀,得到HAp-PEI混合液,室温静置0.5-5h,其中,聚乙烯亚胺溶液的加入量为步骤1)中钙盐溶液体积的
0.1-0.5倍;加入的聚乙烯亚胺溶液浓度为0.1-5mg/ml;
8)以离心方式离心步骤7)得到的混合液,再以去离子水重悬,得到被PEI包被的纳米羟基磷灰石悬液;
9)将步骤8)得到的纳米羟基磷灰石悬液与抗肿瘤基因按质量分数比20:1-16的比例混合形成纳米羟基磷灰石-基因前体复合物,然后将该前体复合物于室温静置3-30min;
10)将步骤9)得到的纳米羟基磷灰石-基因前体复合物与抗肿瘤药物按质量分数比26:
1-10进行混合,并轻轻混合均匀,室温静置3-30min;
11)将步骤10)得到的混合物以离心方式除去游离的抗肿瘤基因和药物,再以去离子水重悬,即得到纳米羟基磷灰石-基因-药物复合物;
所述抗肿瘤基因为野生型p53基因、Rb基因、p16基因、APC基因、MCC基因、DCC基因、MTS基因、PTEN基因中的任一种或几种;
所述抗肿瘤药物为阿霉素、紫杉醇、顺铂、吉西他滨、氟尿嘧啶、盖诺、表阿霉素、环磷酰胺、长春新碱、博莱霉素、多帕菲或它们的衍生物中的任何一种或几种。