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专利号: 2014106424214
申请人: 齐鲁工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 有机化学〔2〕
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种大豆球蛋白碱性多肽的纯化方法,其特征在于,包括以下步骤:

1)取浓度为5×108-2×109cfu/mL的葡萄球菌菌液,离心收集菌体;

2)用磷酸盐缓冲液洗涤步骤1)中离心收集的菌体以除去培养基,收集洗涤后的菌体;

3)取粗大豆球蛋白碱性多肽,加入磷酸盐缓冲液,搅拌均匀,配制成1-2 mg/mL的大豆球蛋白碱性多肽溶液;

4)将步骤2)中洗涤后的菌体重悬于步骤3)配制的大豆球蛋白碱性多肽溶液中,该大豆球蛋白碱性多肽溶液中菌体浓度为1.1×108-2×108cfu/mL,在36-38℃下振荡处理20-

40min;

5)振荡处理结束后,所得溶液采用微孔滤膜滤除滤液,然后采用磷酸盐缓冲液反向冲洗滤膜,使菌体重悬于磷酸盐缓冲液中,得到菌悬液;

6)将步骤5)所得菌悬液进行超声处理,离心,保留上清液;步骤6)中超声处理时,电功率为300W,频率为25Hz,每次作用时间3s间隙时间为4s,共循环作用10-12次;

7)将步骤6)所得上清液冷冻干燥,得纯化的大豆球蛋白碱性多肽。

2.如权利要求1所述的大豆球蛋白碱性多肽的纯化方法,其特征在于:步骤1)中所述的葡萄球菌为培养至对数生长期的金黄色葡萄球菌。

3.如权利要求1所述的大豆球蛋白碱性多肽的纯化方法,其特征在于:步骤2)、步骤3)步骤5)中所用的磷酸盐缓冲液相同,所用磷酸盐缓冲液的浓度为10mmol/L、pH为7.3-7.5。

4.如权利要求1所述的大豆球蛋白碱性多肽的纯化方法,其特征在于:步骤4)中菌体浓度为1.1×108-1.66×108cfu/mL。

5.如权利要求1所述的大豆球蛋白碱性多肽的纯化方法,其特征在于:步骤4)中在37℃下振荡处理30min。

6.如权利要求1所述的大豆球蛋白碱性多肽的纯化方法,其特征在于:步骤5)中所述微孔滤膜为孔径为0.22µm的滤膜。