1.一种乳酸菌颗粒胶囊的制备方法,其特征在于,步骤包括:
一、菌株的制备:将乳酸菌接种于含有甘露醇的MRS液体培养基中进行菌株培养以提高其耐脱水性,菌株收获的最佳时间为菌种生长稳定期的中前期,将结束培养的乳酸菌液投入离心机中离心分离,收集沉淀在底部的菌泥,然后,将PBS缓冲液投入到菌泥中进行菌体洗涤,再次使用离心机离心分离并收集沉淀在底部的菌泥以获得乳酸菌的湿菌泥,加入无菌水,搅拌均匀后加入抗氧化剂,继续搅拌至均匀以获得乳酸菌制粒的菌芯;
二、菌芯的制粒:对步骤一所得菌芯使用第一层包衣剂进行第一层包衣,得到轻压即散的湿菌粉,第一层包衣剂为无菌固态玉米淀粉和羟甲基纤维素钠;利用造粒机对湿菌粉进行第一次制粒,而后用第二层包衣剂对菌粒进行第二层包衣,第二层包衣剂为无菌固态玉米淀粉或无菌固态玉米淀粉与乳糖或L-赖氨酸盐中的任一种形成的固态混合物,再次使用造粒机对二次包衣的菌粒进行第二次制粒,将二次制粒后的菌粒进行干燥得到乳酸菌颗粒;
三、胶囊包装:将步骤二中得到的乳酸菌颗粒装入胶囊,包装即得。
2.根据权利要求1所述的乳酸菌颗粒胶囊的制备方法,其特征在于:所述步骤一中,将–20℃ 保存的乳酸菌接种到含有甘露醇的MRS液体培养基中,菌株培养3 ~ 5 次后,得到驯化后的乳酸菌菌株,将其保存于–20℃备用;含有甘露醇的MRS液体培养基指将基础液体培养基的葡萄糖调整为葡萄糖、蔗糖、乳糖中的任一种糖分与甘露醇组成的混合物,其与甘露醇的质量比为1:1 ~ 1:3;基础液体培养基由下述成分组成:葡萄糖 20 g/L、 蛋白胨 10 g/L、酵母粉 5g/L、 牛肉膏 10 g/L、柠檬酸氢二铵 2 g/L、 MgSO4﹒7H2O 0.58 g/L、 MnSO4﹒H2O 0.25 g/L、 CH3COONa﹒3H2O 5 g/L、 K2HPO4 2 g/L,10 g CaCO3 10 g/L、Tween-80 10ml/L。
3.根据权利要求2所述的乳酸菌颗粒胶囊的制备方法,其特征在于:所述步骤一中,将–20℃ 保存的驯化后的乳酸菌接种到基础液体培养基中,振摇培养8 h,速度为70rpm/min,得到一级摇瓶种子液;将一级摇瓶种子液按8%的接种量接种到基础液体培养基或新配MRS液体培养基的任一种培养基中,振摇培养8 h,速度为70rpm/min,然后,每间隔30min测定菌株的生长曲线,用于确定菌株达到生长稳定期的中前期的时间,培养结束后得到二级摇瓶种子液;将二级摇瓶种子液按8%的接种量接种到基础培养基或新配MRS液体培养基的任一种培养基中,振摇培养至菌株生长稳定期的中前期;新配MRS液体培养基由下述成分组成:蛋白胨5 g/L、玉米浆干粉5 g/L、 酵母粉5 g/L、 红糖120 g/L或含糖量为120 g/L的高粱汁、柠檬酸氢二铵 2 g/L、乙酸钠 5 g/L、丙酮酸钠0.18 g/L、L- 半光胱胺酸盐酸盐 0.05 g/L、血红素0.5 g/L、维生素K2 2 g/L、碳酸钙 10 g/L、K2HPO4 2 g/L、MgSO4·7H2O
0.58 g/L、MnSO4·H2O 0.25 g/L、Tween-80 1ml/L ;其pH 值为6.4, 在121°C 灭菌15 分钟制得。
4.根据权利要求1所述的乳酸菌颗粒胶囊的制备方法,其特征在于:所述步骤一中所述PBS缓冲液是指:每300 ml水溶液中含NaCl 2.4g、KCl 0.06g 、Na2HPO4·12H2O 0.462g、KH2PO4 0.06g。
5.根据权利要求1所述的乳酸菌颗粒胶囊的制备方法,其特征在于:所述步骤一中湿菌泥中加入的无菌水,水体积与湿菌体质量比为3.5:1 ~ 4:1,所述抗氧化剂为维生素C、维生素E和谷氨酸钠中的2 ~3种,抗氧化剂的添加量为湿菌体质量的4%~8%。
6.根据权利要求1所述的乳酸菌颗粒胶囊的制备方法,其特征在于:所述步骤二中的第一层包衣是指:将无菌固态玉米淀粉按照步骤一中的湿菌泥的质量比6:1~8:1的比例加入到步骤一所制备的菌芯中,搅拌均匀,搅拌速度为50 rpm / min ~ 70 rpm / min,而后加入羟甲基纤维素钠,其添加量为步骤一中湿菌泥的质量的0.5 % ~ 1.5%,继续搅拌至均匀,搅拌速度为50 rpm / min ~ 70 rpm / min,得到轻压即散的湿菌粉;第一次制粒是指:将湿菌粉投入造粒机内,调整粒度为65~ 100目,得乳酸菌的菌粒;第二次包衣是指:将无菌固态玉米淀粉或无菌固态玉米淀粉与乳糖、L-赖氨酸盐中的任一种物质形成的固态混合物按一定比例加入到第一次制粒制备的菌粒中,固态玉米淀粉加入量为步骤一中的湿菌泥质量的3~5倍,乳糖和L-赖氨酸盐添加量分别为步骤一中的湿菌泥质量的0.5% ~
1.5%,然后,用搅拌器搅拌均匀,搅拌速度为10 rpm / min ~ 30 rpm / min;菌粒的第二次制粒:将第二次包衣后的菌粒投入造粒机,调整粒度为50~80目,制备乳酸菌的菌粒。
7.根据权利要求1所述的乳酸菌颗粒胶囊的制备方法,其特征在于:所述菌粒的干燥是指:将步骤二中第二次制粒得到的菌粒投入干燥器内进行干燥,控制温度40℃,时间
24h,翻拌速度为0 rpm / min ~ 20 rpm / min。
8.根据权利要求1所述的乳酸菌颗粒胶囊的制备方法,其特征在于:所述乳酸菌为副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、唾液乳杆菌、屎肠球菌和乳酸肠球菌中的任一种。