1. 一种多重信号放大的免标记电化学传感器的制备方法，其特征在于，包括如下步 骤： (1) 连接探针1和捕获探针在金纳米粒子上固定，形成连接探针1-捕获探针-金纳米 粒子聚合物，即Sl-CP-AuNPs聚合物，其中，连接探针1的核苷酸序列为5'-SH-C6-TTT TTC GTG AGC AGC GTC AG-3'，捕获探针的核苷酸序列为 5'-SH-C6-AAA GGG ITG GGC GGG ATG GGT TGAGTC TTC C 丨 AG TGT GAT GAA ACC CAT 03' ； (2) 石墨烯分散在壳聚糖溶液中，形成壳聚糖-石墨烯聚合物，即CS-GR复合物； (3) 在基底电极表面修饰CS-GR复合物，得壳聚糖-石墨烯/基底电极，即CS-GR/基底 电极； (4) 将壳聚糖-石墨烯/基底电极处理后，浸在连接探针2中，得连接探针2/壳 聚糖-石墨烯/基底电极，即S2/CS-GR/基底电极，其中，连接探针2的核苷酸序列为 5' -NH2-C6-TTT TTT TCT GAC GCT GCT CAC G-3' ； (5) 将S2/CS-GR/基底电极浸在Sl-CP-AuNPs聚合物中，通过S1和S2间碱基互补配对 将Sl-CP-AuNPs固定在S2/CS-GR/基底电极上，制得连接探针1-捕获探针-金纳米粒子/ 连接探针2/壳聚糖-石墨烯/基底电极，即传感器Sl-CP-AuNPs/S2/CS-GR/GCE。

2. 根据权利要求1所述的一种多重信号放大的免标记电化学传感器的制备方法，其特 征在于，所述步骤（3)中，基底电极为玻碳电极。

3. 根据权利要求1或2所述的一种多重信号放大的免标记电化学传感器的制备方法， 其特征在于，所述步骤（1)中连接探针1和捕获探针在金纳米粒子上固定，连接探针1和 捕获探针中分别加入三（2-氯乙基）磷酸酯TCEP，室温避光处理1小时；将上述两溶液混 合加入到金纳米粒子中，室温避光搅拌；搅拌的过程中逐滴加入三羟甲基氨基甲烷-盐酸 缓冲液Tris-HCl，再逐滴加入NaCl溶液，室温避光搅拌；将上述溶液离心，将沉淀重新分 散在Tris-HCl和NaCl的混合溶液中，即得连接探针-捕获探针-金纳米粒子聚合物，即 Sl-CP-AuNPs 聚合物。

4. 根据权利要求2所述的一种多重信号放大的免标记电化学传感器的制备方法，其特 征在于，所述步骤（3)中，玻碳电极用三氧化二铝粉打磨成镜面后清洗，晾干后，将CS-GR复 合物滴涂在玻碳电极上，室温晾干，制得壳聚糖-石墨烯/玻碳电极，即CS-GR/GCE。

5. 根据权利要求2所述的一种多重信号放大的免标记电化学传感器的制备方法，其特 征在于，所述步骤（4)中，壳聚糖-石墨烯/玻碳电极浸在戊二醛溶液中，然后清洗；将清洗 后的壳聚糖-石墨烯/玻碳电极浸在连接探针S2中，制得连接探针/壳聚糖-石墨烯/玻 碳电极，即 S2/CS-GR/GCE。

6. 根据权利要求2所述的一种多重信号放大的免标记电化学传感器的制备方法，其特 征在于，步骤（3)中所述清洗，是在二次水中清洗3〜5分钟，然后依次在乙醇和二次水中 超声3〜5分钟。

7. 根据权利要求2所述的一种多重信号放大的免标记电化学传感器的制备方法，其特 征在于，步骤（4)中所述清洗，是分别在NaOH溶液和10mm〇l/L pH 7.4的Tris-HCl缓冲液 中。

8. 权利要求1制备的一种多重信号放大的免标记电化学传感器。

9. 权利要求8所述的标记电化学传感器作为检测器在检测核酸中的应用，其特征在 于，包括以下步骤： (1) 标准溶液配制：配制一组含有不同浓度P53基因的pH为7. 4的Tris-HCl缓冲溶 液为标准液； (2) 建立工作曲线：将所述传感器分别浸入标准溶液中40°C孵育80分钟，孵育后用 Tris-HCl缓冲液冲洗，再将传感器分别浸入NEBuffer 3、氯高血红素、亚甲基蓝溶液中，每 次浸入后均用Tris-HCl缓冲液冲洗，在10ml Tris-HCl、KC1和H202的混合溶液中进行差 分脉冲伏安法（DPV)扫描，记录响应电流I，所述I值与标准溶液中p53基因浓度c的对数 logc成正比，绘制I-log c标准曲线，或采用线性回归法得到I-log c线性回归方程； (3) p53基因含量测定：将待测样品配制为含有步骤（1)相同浓度p53基因的Tris-HCl 缓冲溶液，按照与步骤（2)相同的方法对所述传感器进行孵育和进一步反应后进行差分脉 冲伏安扫描，记录响应电流I ;根据响应电流I和I-l〇g c线性回归方程，得到p53基因含 量。

10.根据权利要求9所述的标记电化学传感器作为检测器在检测核酸中的应用，其特 征在于，步骤（1)中所述Tris-HCl缓冲溶液的浓度为100mmol/L，步骤（2)中所用Tris-HCl 的浓度均为 10mm〇l/L，所述步骤（2)中 NEBuffer 3 含有 0. 5unit/yL N. BstNB I。