1.一种金枪鱼肝脏抗菌肽，其特征在于该金枪鱼肝脏抗菌肽的氨基酸序列为Thr-Gln-Ala-Ala-Phe-Gln-Lys-Phe-Leu-Ala-Val-Ala-Thr-Ser-Gln-Leu-Gly-Lys-Gln-Tyr-His-Tyr-Trp；所述的金枪鱼肝脏抗菌肽MALDI-TOF-MS检测分子量为2686.66 Da。

2.一种权利要求1所述的金枪鱼肝脏抗菌肽的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1）金枪鱼肝脏的预处理：金枪鱼肝脏从冰冻金枪鱼中取出后，按照固液比1 g：3～5mL加入沸腾的乙酸溶液中5～8 min，然后用高速组织捣碎机匀浆；

2）金枪鱼肝脏粗蛋白的提取：将匀浆加热至20～30℃，在功率为200～300W，频率为

50～80kHz 超声波发生器内超声提取30～45 min，9 000 r/min离心15～25 min，取上清液，冷冻干燥，得金枪鱼肝脏粗蛋白；

3）金枪鱼肝脏粗蛋白的酶解：将金枪鱼肝脏粗蛋白按照固液比1 g：3～5mL加入磷酸盐缓冲液，按照肝脏粗蛋白质量的1.5～2.5%加入蛋白酶，于温度55～65℃下酶解2～4 h，得酶解产物；

4）金枪鱼肝脏抗菌肽的制备：将制备的金枪鱼肝脏粗蛋白酶解产物依次经超滤和层析，得到金枪鱼肝脏抗菌肽。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于所述步骤3）中的蛋白酶为中性蛋白

4

酶，酶活力≥2.0×10 U/g；所述的磷酸盐缓冲液为0.02 mol/L，pH 6.5～7.5。

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于所述步骤4）的超滤和层析的具体过程为：超滤：将金枪鱼肝脏粗蛋白酶解产物采用5 kDa超滤膜进行超滤处理，收集分子量小于5 kDa部分，得超滤酶解液；

大孔树脂纯化：将得到的超滤酶解液制成浓度为10～20 mg/mL溶液，以3～5 mL/min加入到大孔树脂层析柱，然后用60%乙醇进行洗脱，洗脱液于50 ℃以下低压旋蒸除去乙醇后，冷冻干燥得大孔树脂精制多肽；

凝胶层析：将上述大孔树脂精制多肽溶于双蒸水配成浓度为10～20 mg/mL的溶液，经过凝胶柱层析分离，用双蒸水进行洗脱，根据215 nm下的吸光度曲线收集洗脱组分，其中，对大肠杆菌和巨大芽孢杆菌抑制率最高组分为凝胶层析酶解物；

高效液相色谱制备：将上述凝胶层析酶解物用双蒸水配成80～100 μg/mL的溶液，利用反相高效液相色谱进行纯化，根据对大肠杆菌和巨大芽孢杆菌抑制率得1个高活性抗菌肽Thr-Gln-Ala-Ala-Phe-Gln-Lys-Phe-Leu-Ala-Val-Ala-Thr-Ser-Gln-Leu-Gly-Lys-Gln-Tyr-His-Tyr-Trp。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于所述大孔树脂为AB-8。

6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于所述凝胶为葡聚糖凝胶G-25；所述RP-HPLC条件为：进样量20～25 μL；色谱柱为Zorbax C18；流动相：40%乙腈；洗脱速度

0.8～1.0 mL/min；紫外检测波长215 nm。

7.权利要求1所述的一种金枪鱼肝脏蛋白抗菌肽用于制备抗菌药物的应用。