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专利号: 201510084979X
申请人: 华南农业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种防止表没食子儿茶素和没食子酸被转化的方法,其特征在于,采用黑曲霉(Aspergillusniger)RAF106菌株进行全细胞生物转化,全细胞生物转化的营养液中加入质量份数2~10份糖用以阻止表没食子儿茶素和没食子酸被进一步转化;

所述的黑曲霉(Aspergillusniger)RAF106菌株,保藏日期为2014年8月27日,保藏编号为CGMCC NO.9608,保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC);

保藏单位地址为中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号;

所述的全细胞生物转化的营养液的配方为:茶多酚或EGCG 1~20份,磷酸氢二钾0.03~0.8份,磷酸二氢钾0.1~3份,硫酸锰0.03~0.7份,氯化钠0.3~2份,硫酸镁0.01~0.3份,酵母或麦芽提取物0.02~2份,糖2~10份;121℃灭菌30min;所述的份数为质量份数。

2.根据权利要求1所述的防止表没食子儿茶素和没食子酸被转化的方法,其特征在于,所述的黑曲霉(Aspergillusniger)RAF106菌株应用种子培养基进行种子培养,获得黑曲霉RAF106菌株的种子分生孢子;

所述的种子培养基的配方为:马铃薯200g,蔗糖20g,琼脂20g,蒸馏水1000mL,pH自然,

121℃灭菌20min。

3.根据权利要求2所述的防止表没食子儿茶素和没食子酸被转化的方法,其特征在于,所述的种子培养的条件为:茄子瓶静置培养,培养温度28~35℃,培养时间3~5d。

4.根据权利要求2所述的防止表没食子儿茶素和没食子酸被转化的方法,其特征在于,黑曲霉RAF106菌株的种子菌接种量为每毫升全细胞生物转化的营养液接种102~108个黑曲霉RAF106菌株分生孢子。

5.根据权利要求2所述的防止表没食子儿茶素和没食子酸被转化的方法,其特征在于,所述的黑曲霉RAF106菌株的种子分生孢子的获取方法为:采用无菌生理盐水冲洗长满黑色黑曲霉分生孢子的茄子瓶,并以接种环轻轻刮取种子培养基表面,得到黑曲霉分生孢子悬浮液。

6.根据权利要求1所述的防止表没食子儿茶素和没食子酸被转化的方法,其特征在于,所述的糖为葡萄糖、蔗糖、淀粉、β-环化糊精、乳糖、甘露糖、麦芽糖、木糖、核糖、阿拉伯糖、半乳糖、果糖、海藻糖和纤维二糖中的一种或者至少两种混合物。

7.根据权利要求1所述的防止表没食子儿茶素和没食子酸被转化的方法,其特征在于,所述的全细胞生物转化的条件为:温度25~42℃,摇床转速160~220r/min,时间20~60h。

8.根据权利要求1所述的防止表没食子儿茶素和没食子酸被转化的方法,其特征在于,黑曲霉全细胞生物转化茶多酚或EGCG连续反应60~112小时,表没食子儿茶素和没食子酸仍然不被进一步转化。