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专利号: 2015102389199
申请人: 广西壮族自治区梧州食品药品检验所
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 测量;测试
更新日期:2023-07-28
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种高精度测量猪尿中的莱克多巴胺、克仑特罗、沙丁胺醇含量的方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1:样品预处理;收集猪尿,首先加入β-盐酸葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶进行酶解,酶解结束后加入三氯乙酸沉淀猪尿中的蛋白质,加入4倍猪尿体积的-pH范围为5.5~6的乙酸铵缓冲液,漩涡混合器混合后离心;取离心后的上清液;

步骤2:将上清液加入到SLE柱后,静置2~4分钟;

步骤3:采用二元洗脱剂对SLE柱洗脱至少两次,接收洗脱液,得到含有莱克多巴胺、克仑特罗、沙丁胺醇的洗脱液;

步骤4:采用高效液相色谱法对步骤3得到的洗脱液进行检测,所述的高效液相色谱法的具体参数为:色谱柱:C18柱,150mm×3.9mmID

柱温:室温

流动相:0.05%磷酸水溶液和乙腈的混合液,其中0.05%磷酸水溶液和乙腈的体积比为100:12;

检测器:UV检测器;

检测波长:217nm;

其中,所述的二元洗脱剂为正丁醇和乙酸甲酯的混合物,其中正丁醇和乙酸甲酯的重量比为4:1~5:1。

2.根据权利要求1所述的高精度测量猪尿中的莱克多巴胺、克仑特罗、沙丁胺醇含量的方法,其特征在于,所述的猪尿为1ml,缓冲溶液为4ml,步骤2中所取的上清液为0.5ml,所述的步骤3中,每次洗脱时所用的洗脱剂为0.5ml。

3.根据权利要求2所述的高精度测量猪尿中的莱克多巴胺、克仑特罗、沙丁胺醇含量的方法,其特征在于,每毫升的尿液中加入β-盐酸葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶12μL。

4.根据权利要求2所述的高精度测量猪尿中的莱克多巴胺、克仑特罗、沙丁胺醇含量的方法,其特征在于,所述的三氯乙酸和猪尿的质量比为1:98~100。

5.根据权利要求1所述的高精度测量猪尿中的莱克多巴胺、克仑特罗、沙丁胺醇含量的方法,其特征在于,所述的步骤1中,漩涡混合器混合处理的时间为0.5~1.5分钟。

6.根据权利要求5所述的高精度测量猪尿中的莱克多巴胺、克仑特罗、沙丁胺醇含量的方法,其特征在于,所述的步骤1中,所述的离心处理的具体操作为:将经混合处理的溶液在离心机中以9000~11000转/分钟的速度离心0.5~1.5分钟。

7.根据权利要求1至6任一所述的高精度测量猪尿中的莱克多巴胺、克仑特罗、沙丁胺醇含量的方法,其特征在于,所述的SLE柱为奥秘山东科技有限公司生产的介质液液萃取SLE柱,所述的高效液相色谱法所采用的仪器型号为LC-2010型高效液相色谱仪。