1.一种测定甘蔗中不同形式植物甾醇含量的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)通过乙醇浸提,从甘蔗粉末中提取得到游离态甾醇提取物;
(2)通过碱式皂化反应,将甘蔗粉末中酯态甾醇转化为游离态甾醇,并萃取得到含游离态甾醇以及酯态甾醇对应当量甾醇的总提取物;
(3)将甘蔗粉末置于酸性溶液中进行酸水解反应,再向酸解反应液中加入碱性溶液进行皂化反应,将甘蔗粉末中酯态甾醇、配糖类甾醇和酰基配糖类甾醇转化为游离态甾醇,并萃取得到含游离态甾醇以及酯态甾醇、配糖类甾醇和酰基配糖类甾醇对应当量甾醇的总提取物;
(4)利用高效液相色谱技术测定步骤(1)~(3)中提取物的含量,计算得到甘蔗中酯态甾醇的含量以及糖类甾醇和酰基配糖类甾醇的总含量。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(3)中,所述酸性溶液为盐酸-乙醇溶液。
-3
3.如权利要求2所述的方法,其特征在于,所述盐酸-乙醇溶液的用量为32×10 ~-3
48×10 mol/g。
4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(3)中,所述碱性溶液为氢氧化钾-乙醇溶液。
5.如权利要求4所述的方法,其特征在于,所述氢氧化钾-乙醇溶液的用量为-3 -3
64×10 ~96×10 mol/g。
6.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述酸水解反应的温度为60~80℃,时间为1~1.5h;所述碱皂化反应的温度为70~90℃,时间为1~1.5h。
7.如权利要求1所述的方法,其特征在于,酸性溶液中还添加有内标物,所述内标物为
6-酮胆甾烷醇。
8.如权利要求7所述的方法,其特征在于,所述6-酮胆甾烷醇的浓度为4.8~12μg/mL。
9.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(3)中,萃取过程采用的萃取剂为乙醚。
10.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(4)中,高效液相色谱的条件为:色谱柱为Luan 5μmC18,流动相为甲醇∶乙腈=4∶1,1.2mL/min,进样量20μL,柱温30℃,检测波长210nm。