1.一种基于原位形成光活性纳米材料模拟酶的碱性磷酸酯酶活性检测方法,其特征在于:
a、二氧化钛纳米材料的制备:将5mL钛酸四丁酯或者四氯化钛逐滴加入到75mL超纯水中,混合后的溶液在室温下持续搅拌,然后将上述溶液转移到反应釜内并加热到160℃持续
24h,离心获得产物并用超纯水洗涤多次,最后烘干获得白色二氧化钛纳米颗粒;
b、碱性磷酸酯酶活性的测定:5μmol/L的碱性磷酸酯酶的底物与10μL不同浓度的碱性磷酸酯酶混合后加入到96孔板中,室温下反应一段时间;加入10μL 1.5mg/mL的二氧化钛纳米材料反应15min后,加入100μL pH为4.0的0.2mol/L的醋酸缓冲溶液和20μL 5mmol/L的纳米材料模拟酶的特征底物,放置在氙灯下用λ≥400nm的可见光照射10min后,在酶标仪上测定吸收光谱或者荧光光谱。
2.根据权利要求1所述的一种基于原位形成光活性纳米材料模拟酶的碱性磷酸酯酶活性检测方法,其特征在于所述的碱性磷酸酯酶的底物,选自于邻苯二酚磷酸酯、水杨酸磷酸酯。
3.根据权利要求1所述的一种基于原位形成光活性纳米材料模拟酶的碱性磷酸酯酶活性检测方法,其特征在于所述的纳米材料模拟酶的特征底物有3,3’,5,5’―四甲基联苯胺、
2,2’-联氮基双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐、10-乙酰基-3,7-二羟基吩嗪。