1.一种大孔吸附树脂分离纯化辣蓼黄酮的工艺,其特征在于包括以下步骤:(1)利用超声-酶解偶联法对辣蓼药材进行总黄酮的提取;
(2)将步骤(1)获得的提取液依次经过石油醚、氯仿、乙酸乙酯以及正丁醇萃取,收集乙酸乙酯部分和正丁醇部分的黄酮,减压蒸干备用;
(3)将步骤(2)获得的乙酸乙酯部分和正丁醇部分的黄酮配制成浓度为0.5~1.5mg/mL的上柱液,通过预处理好的大孔吸附树脂,用60~80%乙醇洗脱4~10倍量柱体积,洗脱液进行蒸发浓缩,真空干燥,即得纯化辣蓼总黄酮;
步骤(1)按以下操作进行:
⑴将辣蓼药材干燥、粉碎,分别加入重量为辣蓼药材重量0.2~0.4%的果胶酶和纤维素酶,混合均匀,加入pH值为4.8的HAc-NaAc缓冲液,进行超声-酶解;
⑵用Na2CO3溶液调节超声-酶解后的溶液pH值为9.0,80~90℃水浴10~20min使酶失活;
⑶加入乙醇浸提24h,过滤收集浸提液,滤渣再加入乙醇溶液重复浸提一次,过滤,合并两次浸提液。
2.根据权利要求1所述的大孔吸附树脂分离纯化辣蓼黄酮的工艺,其特征在于所述预处理按以下操作进行:取大孔吸附树脂用无水乙醇浸泡24h充分溶胀之后装柱,用95%乙醇冲洗,收集洗脱液,检查洗脱液无浑浊即可停止收集洗脱液,然后用去离子水洗脱,除去乙醇;用4倍量柱体积的3%盐酸溶液冲洗,去离子水冲洗至中性;用4倍量柱体积的3%氢氧化钠溶液冲洗,去离子水冲洗至中性即可。
3.根据权利要求1所述的大孔吸附树脂分离纯化辣蓼黄酮的工艺,其特征在于:所述大孔吸附树脂为弱极性或极性的大孔吸附树脂。
4.根据权利要求1所述的大孔吸附树脂分离纯化辣蓼黄酮的工艺,其特征在于:所述大孔吸附树脂为D101、AB-8、DM-130或XDA-8型号。
5.根据权利要求4所述的大孔吸附树脂分离纯化辣蓼黄酮的工艺,其特征在于:所述超声-酶解温度为30~60℃,时间为1.0~2.0h。
6.根据权利要求4所述的大孔吸附树脂分离纯化辣蓼黄酮的工艺,其特征在于:所述HAc-NaAc缓冲液与辣蓼药材的体积质量比为5~50mL:1g。
7.根据权利要求4所述的大孔吸附树脂分离纯化辣蓼黄酮的工艺,其特征在于:所述步骤⑶中加入乙醇后,乙醇的终体积浓度为60~80%。