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专利号: 2015105750009
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种制备嘌呤核苷磷酸化酶的方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)将核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的基因,以pET28a(+)为表达载体,以大肠杆菌BL21(DE3)为宿主,构建重组菌;

(2)发酵培养重组菌制备嘌呤核苷磷酸化酶。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述发酵培养是将重组菌种子液转接到rLB/Kan液体培养基中,37℃培养至对数生长期中期,加入异丙基-β-硫代半乳糖苷至终浓度0.05mmol/L,30℃诱导培养4-5h。

3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述发酵培养是将重组菌种子液,r按1%接种量转接到LB/Kan液体培养基中,37℃培养至发酵液OD600=0.6,加入异丙基-β-硫代半乳糖苷至终浓度为0.05mmol/L,30℃诱导4h。

4.一种重组表达嘌呤核苷磷酸化酶的大肠杆菌工程菌,其特征在于,是将核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的基因,以pET28a(+)为表达载体,以大肠杆菌BL21(DE3)为宿主构建得到的。

5.权利要求4所述大肠杆菌工程菌在生产嘌呤核苷磷酸化酶中的应用方法。

6.根据权利要求1所述方法制备得到的嘌呤核苷磷酸化酶。

7.权利要求6所述嘌呤核苷磷酸化酶在麦芽糖化和啤酒生产中的应用方法。