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专利号: 2015106015895
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 测量;测试
更新日期:2023-10-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种测定黄酒中7种有机酸的方法,其特征在于,所述方法是采用固相萃取-液相色谱联用法测定,包括以下步骤:(1)标准样品的制备:称取草酸、酒石酸、苹果酸、乳酸、乙酸、柠檬酸、琥珀酸配制成混合标准母液,在进行有机酸线性相关性测定时进行梯度稀释;(2)固相萃取柱净化:依次用纯甲醇和水活化小柱,将待净化液至SPE小柱进行净化处理,得到的净化液过微孔滤膜,备用;(3)高效液相色谱检测:使用C18色谱或者离子排斥色谱,分别对标准样品和待测样品进行检测,记录色谱图,经色谱仪自带软件积分得到峰面积,绘制7种有机酸标准曲线,并计算得到待测样品中的各有机酸的含量;

所述固相萃取柱为强阳离子交换固相萃取小柱SCX或弱阳离子交换固相萃取小柱WCX;

所述C18色谱的具体条件是:色谱柱为Xselect HSS T3,流动相为10mM的NaH2PO4,pH 

2.9,柱温为25~35℃,检测波长为210~280nm,进样量为10~20μl,流速:0.8mL/min;

所述离子排斥色谱的具体条件是:色谱柱为IC PAKTM ION Exclusion,流动相为体积比97:3的H2SO4溶液和乙腈混合液,柱温为50℃~60℃,检测波长为210~280nm,进样量为10~20μl;其中流动相中H2SO4溶液浓度变化过程是:0min~35min时由5mM低度上升到15mM,

35min~35min时浓度为5mM,流速:0.6mL/min。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述混合标准母液或梯度稀释是采用pH 

2.9的10mM的NaH2PO4。

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述方法具体是:(1)标准样品的制备

分别称取HPLC色谱纯度在99%以上的草酸、酒石酸、苹果酸、乳酸、乙酸、柠檬酸、琥珀酸,采用流动相对7种不同的有机酸配制成混合标准母液,在进行有机酸线性相关性测定时,采用流动相对混合标准品母液液进行梯度稀释,各有机酸的浓度范围均在0.0001~

40g/L之间;

(2)固相萃取柱净化

依次用1-3倍SPE柱体积的纯甲醇和水活化小柱,将待净化液至SPE小柱进行净化处理,舍去前3mL净化液,得到的净化液过0.22或0.45μm的微孔滤膜,备用;

(3)高效液相色谱检测

色谱条件1:C18色谱检测

色谱柱:Xselect HSS T3;

流动相:10mM的NaH2PO4;

pH:2.9;

柱温:25~35℃;

检测波长:210~280nm;

进样量:10~20μl;

流速:0.8mL/min;

或者是色谱条件2:离子排斥色谱检测

色谱柱:IC PAKTM ION Exclusion流动相:H2SO4溶液:乙腈=97:3;

柱温:50℃~60℃;

检测波长:210~280nm;

进样量:10~20μl;

流速:0.6mL/min;

流动相中H2SO4溶液浓度变化过程:0min~35min,由5mM低度上升到15mM,35min~

35min,浓度为5mM;

(4)定量测定

按照上述固相萃取净化条件对待测样品进行处理,并采用上述色谱条件分别对标准溶液和待测样品进行色谱检测,记录色谱图,经色谱仪自带软件积分得到峰面积,绘制7种有机酸标准曲线,并计算得到待测样品中的草酸、酒石酸、苹果酸、乳酸、乙酸、柠檬酸和琥珀酸的含量。