1.一种固定化酶转化DL-ATC合成L-半胱氨酸的方法，其特征在于包括如下步骤：（1）共固定化酶系的制备

将由DL-ATC消旋酶、刚性连接肽和L-ATC水解酶组成的融合蛋白以及氮-氨甲酰-L-半胱氨酸水解酶加入到含有聚乙烯醇和海藻酸钠的水溶液中，充分混匀后，加入戊二醛溶液进行交联反应；将反应液滴入氯化钙溶液中，滤出小球体；小球体再浸泡在氯化钙溶液中进行硬化处理；滤出小球体后再用戊二醛溶液交联，再滤出小球体，洗涤后备用；

所述的融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述的氮-氨甲酰-L-半胱氨酸水解酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示；

（2）共固定化酶系转化DL-ATC生成L-半胱氨酸

将步骤（1）得到的含有共固定化酶系的小球体加入到含有DL-ATC、KH2PO4、山梨醇的体系中进行反应得到L-半胱氨酸。

2.根据权利要求1所述的固定化酶转化DL-ATC合成L-半胱氨酸的方法，其特征在于：步骤（1）中所述的融合蛋白通过包括如下步骤的方法进行制备：

1）将序列如SEQ ID NO.3所示的DNA片段通过NdeI、EcoRI连接到pET-28a(+)载体上构建得到表达载体pET-atcAB；

2）将表达载体pET-atcAB转入大肠杆菌BL21(DE3)后进行诱导表达，表达完成后进行

2+

细胞破碎，用Ni 亲和层析的方法纯化得到目的蛋白。

3.根据权利要求1所述的固定化酶转化DL-ATC合成L-半胱氨酸的方法，其特征在于：步骤（1）中所述的氮-氨甲酰-L-半胱氨酸水解酶通过包括如下步骤的方法进行制备：

1）将序列如SEQ ID NO.6所示的DNA片段通过NdeI、EcoRI连接到pET-28a(+)载体上构建得到表达载体pET-atcC；

2）将表达载体pET-atcC转入大肠杆菌BL21(DE3)后进行诱导表达，表达完成后进行细

2+

胞破碎，用Ni 亲和层析的方法纯化得到目的蛋白。

4.根据权利要求1所述的固定化酶转化DL-ATC合成L-半胱氨酸的方法，其特征在于：步骤（1）中所述的融合蛋白与氮-氨甲酰-L-半胱氨酸水解酶的质量比为1:0.2-1:1；

步骤（1）中所述的含有聚乙烯醇和海藻酸钠的水溶液为pH 7.5、含80g/L聚乙烯醇及

15g/L海藻酸钠的水溶液；

步骤（1）中所述的氯化钙溶液的浓度为20g/L；

步骤（1）中洗涤所滤出小球体的溶液为pH 7.5、含15g/L KH2PO4的水溶液。

5.根据权利要求1所述的固定化酶转化DL-ATC合成L-半胱氨酸的方法，其特征在于：步骤（1）中第一次交联所用的戊二醛溶液的质量分数为10%，戊二醛溶液的体积为交联反应体系总体积的3%-8%，交联反应的时间为3h；

步骤（1）中第二次交联所用的戊二醛溶液的质量分数为0.02%，交联反应的时间为3h。

6.根据权利要求1所述的固定化酶转化DL-ATC合成L-半胱氨酸的方法，其特征在于：步骤（1）为：取融合蛋白与氮-氨甲酰-L-半胱氨酸水解酶按质量比为1:0.2-1:1的量的比例加入到pH 7.5、含80g/L聚乙烯醇及15g/L海藻酸钠的水溶液中，至总蛋白终浓度为

4-10mg/mL，充分混匀后，加入质量分数为10%的戊二醛溶液使该溶液在交联反应体系中的体积分数达到3%-8%，充分混匀后于4℃下交联反应3h；将反应液滴入到20g/L的氯化钙溶液中，滤出小球体；将小球体放置在20g/L的氯化钙溶液中，再浸泡硬化1h；滤出小球体后在4℃下用质量分数为0.02%的戊二醛溶液再交联3h，再滤出小球体；用pH为7.5的含

15g/L KH2PO4的水溶液洗涤3次，置于4℃备用。

7.根据权利要求1所述的固定化酶转化DL-ATC合成L-半胱氨酸的方法，其特征在于：步骤（2）的反应体系为：含有共固定化酶系的小球体浓度为50-200g/L，DL-ATC浓度为

5-20g/L，KH2PO4浓度为0.5-2g/L，山梨醇浓度为10-200g/L，pH为6-8。

8.根据权利要求1所述的固定化酶转化DL-ATC合成L-半胱氨酸的方法，其特征在于：步骤（2）中所述的反应的条件为：反应温度为28-37℃，搅拌转速为100-200转/分钟，反应时间为2-6h。

9.根据权利要求1所述的固定化酶转化DL-ATC合成L-半胱氨酸的方法，其特征在于：步骤（2）反应完成后通过过滤回收含有共固定化酶系的小球体，再用KH2PO4浓度为2g/L、山梨醇浓度为200g/L、pH为7.5的洗涤缓冲液洗涤小球体后重复用于步骤（2）。

10.一种用于转化DL-ATC合成L-半胱氨酸的共固定化酶系，其特征在于：通过权利要求1中的步骤（1）得到。